染矽塵大鼠肺組織TGF-β-,1-的表達及其對Ⅰ、Ⅲ型膠原的調控.pdf

1、目的:本實驗以染矽塵大鼠模型為對象,以組織芯片技術為手段,旨在闡明染矽塵大鼠早期TGF-β<,1>的表達及其對Ⅰ、Ⅲ型膠原的調控.具體地講,本實驗主要探討如下兩個問題:1、染矽塵大鼠不同時間點肺組織TGF-β<,1>表達的變化;2、染矽塵大鼠不同時間點肺組織Ⅰ、Ⅲ型膠原的變化;3、染矽塵大鼠肺組織TGF-β<,1>對Ⅰ、Ⅲ型膠原的調控作用.方法:本實驗采用清潔級Wistar大鼠96只,體重200-240克.隨機將大鼠分為2組,即對照組和

2、染矽塵組,每組48只.對照組大鼠氣管內注入生理鹽水,染矽塵組大鼠氣管內注入矽塵混懸液.氣管暴露法建立大鼠矽肺模型.對照組動物氣管內注入1ml0.9％NaCl溶液,染矽塵組氣管內注入濃度為50 mg/ml的矽塵混懸液1ml.模型建立后,每組分6個時間點(1d,3d,7d,14d,21d,28d)分別取8只大鼠將其處死.HE染色觀察大鼠肺組織矽結節(jié).天狼猩紅染色法結合偏振光顯微鏡觀察Ⅰ、Ⅲ型膠原及矽塵顆粒.用組織芯片儀制作組織芯片,用SP法

3、檢測組織芯片TGF-β<,1>的表達情況.對選定的視野用Nikon Eclipse E800偏振光顯微鏡觀察,用WV-CP240/G Panasonic colour CCTV Camera攝像并存入計算機,然后用Image-Pro Plus Version 4.5 for windows<'TM>圖象分析系統(tǒng)進行定量分析.用Hue Intensity Saturation(HIS)顏色分割法選定陽性目標區(qū)域.用陽性區(qū)域的面積百分比代表