溫化膠囊對人肝癌細胞株Bel-7402凋亡和代謝的影響.pdf

1、目的：研究中藥復方制劑溫化膠囊對人肝癌細胞株Bel-7402的凋亡和代謝的影響，本次研究力求在原有研究成果的基礎上，通過對人肝癌Bel-7402細胞株的體外培養(yǎng)，來進一步觀察溫化膠囊對于腫瘤細胞的影響。 方法：實驗共分四部分。第一部分：對人肝癌細胞株Bel-7402進行體外細胞培養(yǎng)，分設空白對照組、150μg/ml溫化膠囊組及750μg/ml溫化膠囊組三組，使用流式細胞儀分析溫化膠囊對人肝癌細胞株Bel-7402凋亡的影響。利用

2、倒置相差顯微鏡觀察細胞株加藥前后的形態(tài)學變化。第二部分：速率法檢測溫化膠囊對Bel-7402細胞培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶(LDH)水平的影響。第三部分：應用酶聯(lián)免疫吸附劑測定(ELISA)的檢測方法檢測溫化膠囊對Bel-7402細胞培養(yǎng)上清液中血管內皮細胞生長因子(VEGF)水平的影響。第四部分：應用ELISA的檢測方法檢測溫化膠囊對Bel-7402細胞培養(yǎng)上清液中轉化生長因子β1(TGF-β1)水平的影響。 結果：流式細胞儀檢測

3、顯示：與對照組相比較，溫化膠囊能夠提高Bel-7402細胞的凋亡率，其作用的強度與藥物的劑量呈正相關；細胞形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)，加入溫化膠囊后細胞質內出現(xiàn)了空泡樣結構，細胞變小、一或變細變長，或變圓，部分細胞脫落漂浮于培養(yǎng)基中，且隨著藥物作用時間的延長和藥物濃度的增加，空泡樣結構的數(shù)量亦呈進行性增加，并可融合成大泡，其漂浮細胞也增多：對LDH細胞因子的檢測表明，溫化膠囊高劑量組(750μg/ml)的LDH水平明顯高于對照組(P<0.05)，但

4、溫化膠囊高劑量組(750μg/ml)和溫化膠囊低劑量組(150μg/ml)、溫化膠囊低劑量組(150μg/ml)和對照組相比較，二者均沒有顯著性差異(P>0.05)，本次研究中溫化膠囊高劑量組(750μg/ml)的LDH水平明顯高于對照組，有統(tǒng)計學差異，反應出高劑量組的Bel-7402細胞細胞膜的受損程度高于對照組，即溫化膠囊對此種細胞株的細胞毒性作用強于對照組。應用ELISA方法檢測VEGF和TGF-β1兩因子的水平，溫化膠囊高劑量組

5、(750μg/ml)與對照組相比，TGF-β1上調，有顯著性差異(P<0.05)，溫化膠囊低劑量組(150μg/ml)與對照組比較未見顯著性差異(P>0.05)，而溫化膠囊對VEGF的作用不明顯，本次實驗中對照組、溫化膠囊低劑量組(150μg/ml)與溫化膠囊高劑量組(750μg/ml)三組相比較，P>0.05，均無顯著性差異。 結論：溫化膠囊立足《內經(jīng)》有關腫瘤的論述，通過溫陽散寒與化痰活血從而發(fā)揮溫陽化氣散結的作用。全方僅五