胰島素控制糖尿病大鼠下頜前伸后顳下頜關節(jié)盤的變化.pdf

1、目的：功能性下頜前伸對于AngleⅡ類錯牙合畸形的治療有不可替代的作用。它針對青春生長發(fā)育高峰或高峰前期的患者，利用其生長發(fā)育的潛力及咀嚼肌產(chǎn)生的頜骨生長改良效果，改變下頜的位置，使下頜前伸肌功能活動加強。對于正常的下頜前伸患者的顳下頜關節(jié)盤進行研究，發(fā)現(xiàn)關節(jié)盤出現(xiàn)適應性改建。隨著現(xiàn)代人類勞動、生活方式及飲食習慣的改變，糖尿病的發(fā)病率在逐年提高且發(fā)病年齡日趨年輕化，其中1型糖尿病多發(fā)生于青少年。越來越多的糖尿病患者有正畸治療的要求。但因

2、糖尿病合并骨質(zhì)疏松及骨關節(jié)的損害，影響了關節(jié)膠原纖維和細胞的重建。目前有關糖尿病患者進行顳下頜關節(jié)功能性前伸后的關節(jié)改建的相關正畸研究甚少。本試驗擬通過建立下頜前伸的1型糖尿病大鼠模型，觀察該過程中及結束后大鼠顳下頜關節(jié)盤是否有變化，探討早期1型糖尿病患者能否進行下頜前伸治療，為臨床應用提供基礎試驗的理論依據(jù)。 方法：健康雄性SD大鼠3周齡，體重45至55克。第一階段實驗為大鼠糖尿病模型最佳用藥量選擇實驗：將112只大鼠隨機分為

3、16組，每組7只，分別為注射鏈尿佐菌素溶液(STZ)40mg/kg體重、55mg/kg體重、60mg/kg體重、65mg/kg體重、70mg/kg體重、75mg/kg體重、80mg/kg體重、85mg/kg體重、90mg/kg體重、95mg/kg體重、100mg/kg體重、105mg/kg體重、110mg/kg體重、115mg/kg體重、120mg/kg體重、130mg/kg體重組?？崭?4小時后一次性腹腔內(nèi)注射相應劑量的STZ溶液，7

4、2h后取尾靜脈血進行血糖測定，將血糖>16.7mmol/L，尿糖>+++定為糖尿病動物模型。每日檢測血糖，10日后對各組的動物成模數(shù)量及死亡數(shù)量進行分析，分析成模所需用最佳藥量。第二階段實驗為前伸下頜實驗：健康雄性SD大鼠3周齡105只，體重45至55克，隨機分為3組為正常對照組(A組)35只，糖尿病組(B組)35只，糖尿病胰島素治療組(C組)35只。每組隨機分為5組，即下頜前伸0天，7天，14天，21天，30天組。B、C組大鼠空腹24

5、小時后一次性腹腔內(nèi)注射STZ溶液85mg/kg體重，A組給予同等劑量的緩沖液腹腔注射，72h后取尾靜脈血進行血糖測定，將血糖>16.7mmol/L，尿糖>+++定為糖尿病動物模型。糖尿病模型成模后第四天C組大鼠即開始用胰島素頸背部皮下注射控制血糖，范圍為8-10mmol/L。A組、B組給予同等劑量的生理鹽水注射。糖尿病模型成模10天后各組大鼠配戴下頜前伸裝置，24小時持續(xù)前伸下頜。 于前伸下頜0天，7天，14天，21天，30天，

6、分別將各組動物心臟放血處死，不破壞關節(jié)盤突附著關系迅速完整地取出關節(jié)盤。生理鹽水沖洗。左側(cè)關節(jié)經(jīng)4％多聚甲醛固定72小時后用7％EDTA(乙二胺四乙酸二鈉)脫鈣，約六周后常規(guī)脫水、包埋，盤突復合體矢狀方向縱切標本，HE染色，光鏡下組織學觀察。右側(cè)關節(jié)經(jīng)2.5％戊二醛的固定24小時(4℃保存)后表面噴金，制作掃描電鏡切片，盤突復合體矢狀方向縱向鏡下觀察。 結果：1 制造3周齡SD大鼠糖尿病模型，STZ(鏈尿佐菌素)制劑最佳的用量：

7、大鼠空腹24小時后一次性腹腔內(nèi)注射85-95mg/kg STZ溶液，可以作為成功造模的最佳劑量。 2.組織學切片：A、C組關節(jié)盤變化未見明顯差異，均為1周時盤內(nèi)膠原纖維束平直致密，前、后帶的膠原纖維前后向走行明顯，中間帶膠原纖維的波浪狀起伏幅度變小。2周時關節(jié)盤進一步纖維化，細胞明顯增多。3周時比2周時細胞較為成熟，前帶纖維束不如后帶粗大，中間帶排列致密。4周時細胞更為成熟，膠原纖維束更明顯。B組纖維出現(xiàn)病理性改變，前伸初期關節(jié)

8、盤各帶的纖維排列疏松，隨時間的推移甚至出現(xiàn)纖維束的扭曲和斷裂，纖維化不及另兩組顯著且細胞成分較少，未見明顯的增殖的細胞。 3.掃描電鏡切片：在下頜前伸過程中A、B、C三組關節(jié)盤出現(xiàn)適應性改建。各時期A組、C組組織學變化相近，無明顯差異，前伸下頜7天、14天時改建顯著，主要表現(xiàn)為盤前、后帶的波紋樣結構沿矢狀方向排列更典型，前帶的條索狀波紋變細長，后帶的波紋變粗寬，中間帶的編織狀波紋沿矢狀方向被拉伸呈致密排列，起伏變小，盤波紋表面的

9、纖維狀薄膜物質(zhì)較前伸前增多。而B組表現(xiàn)出波紋結構更多的斷裂與間隙，前帶、中間帶的變化不如其他兩組明顯。前伸下頜21天、30天時盤波紋表面的纖維狀薄膜物質(zhì)增多，A組和C組未見明顯的進一步適應性改建，B組表現(xiàn)出波紋結構更多的斷裂與間隙等病理性改建。 結論：1 糖尿病大鼠的骨質(zhì)疏松，骨關節(jié)改建受到抑制，導致下頜前伸后關節(jié)出現(xiàn)病理性改建，不利于下頜前伸治療及效果的保持。 2.早期良好的胰島素控制，使糖尿病大鼠的功能性下頜前伸后顥