基因芯片篩查STEMI患者PBMCs相關(guān)基因及TNFSF6、CYP1A1的表達(dá).pdf

1、急性心肌梗塞(AMI)是冠心病的嚴(yán)重階段，經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)(PCI)是目前治療AMI的主要手段，然而再灌注早期冠狀動(dòng)脈血流的快速恢復(fù)可引起心肌缺血/再灌注損傷(IRI)。氧化應(yīng)激(oxidativestress，OS)反應(yīng)是導(dǎo)致IRI發(fā)生的重要機(jī)制，是多基因表達(dá)異常引起的病理生理過(guò)程。以往的研究常局限于對(duì)單個(gè)基因或少數(shù)幾個(gè)功能相關(guān)基因的分析，很難從整體上把握心肌缺血再灌注損傷分子機(jī)制?；蛐酒瑸檠芯啃募RI導(dǎo)致的疾病提供了強(qiáng)有力的系

2、統(tǒng)研究手段。腫瘤壞死因子配體超家族成員6(1NFSF6)和細(xì)胞色素P4501A1(CYP1A1)參與細(xì)胞OS反應(yīng)。外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)在缺血等致病因素影響下異?；罨菂⑴c機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)的重要細(xì)胞。 目的： 1.了解ST段抬高型AMI(STEMI)患者PCI術(shù)前后心肌IRI損傷過(guò)程中細(xì)胞氧化應(yīng)激及毒性相關(guān)基因的變化。 2.觀察心肌IRI過(guò)程中TNFSF6和CYP1A1基因含量表達(dá)的改變及臨床意義。

3、 材料與方法： 1.研究對(duì)象 STEMI組：STEMI患者11例，男7例，女4例，平均年齡61.44±13.70歲(33～75歲)，所有病例均參照2001年中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)AMI的診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷，病例入選標(biāo)準(zhǔn)：診斷明確的急性ST段抬高心肌梗塞，其中梗塞部位：廣泛前壁2例、前壁或前間壁4例、下壁或后壁5例(其中伴右室梗塞者2例)、廣泛性心肌梗塞組(兩個(gè)部位及以上)4例。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：AMI合并以下疾?。宏惻f性心肌梗塞

4、病史、心源性休克或泵衰竭、心臟瓣膜病、自身免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤、嚴(yán)重的肝腎功能不全。正常對(duì)照組為與患者年齡、性別相匹配的健康志愿者10人，男7人，女3人，平均年齡53.00±6.55歲(32~61)。所有患者均沒(méi)有接受抗腫瘤藥物、放射和免疫抑制劑治療，均非移植患者、人類免疫缺陷病毒感染(艾滋病)患者、粒細(xì)胞缺乏者。 STEMI組于急性發(fā)病入院確診后即刻抽取肘靜脈血10ml，立即注入含0.05ml肝素的無(wú)菌離心管，所有過(guò)程

5、均嚴(yán)格無(wú)菌操作。急性心梗常規(guī)等治療第3d、第7d再各抽一次肘靜脈血10ml；正常對(duì)照組：晨起空腹抽取肘靜脈血10ml，方法同上。 2.實(shí)驗(yàn)方法 2，1PBMCs的分離采用淋巴細(xì)胞分離液密度梯度離心法。 2,2基因芯片篩查心肌IRI過(guò)程中相關(guān)基因的變化。 2,3Real-timePCR驗(yàn)證TNFSF6、CYP1A1基因表達(dá)的含量。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示，各組間比

6、較用方差分析，相關(guān)分析采用簡(jiǎn)單相關(guān)分析法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.STEMI組中，顯示顯著變化的基因有14個(gè)，其中表達(dá)顯著上調(diào)的為8個(gè)，顯著下調(diào)的為4個(gè)。 上調(diào)的基因中，細(xì)胞生長(zhǎng)停滯/衰老相關(guān)1個(gè)(GADD45A)，氧化和代謝應(yīng)激相關(guān)1個(gè)(PRDX2)，熱休克相關(guān)3個(gè)(HSPD1，DNAJB1，DNAJB2)，DNA損害和修復(fù)相關(guān)1個(gè)(RAD50)，及凋亡信號(hào)相關(guān)2個(gè)(TNFSF6，TRA

7、DD)。 下調(diào)的基因中細(xì)胞增殖/癌變相關(guān)1個(gè)(CCNG1)，氧化和代謝應(yīng)激相關(guān)2個(gè)(CAT，CYP1A1)，DNA損害和修復(fù)相關(guān)1個(gè)(ATM)。 2.STEMI組TNFSF6、CYP1A1基因的相對(duì)含量前者明顯高于正常對(duì)照組、后者明顯低于正常對(duì)照組。 結(jié)論： 1.AMI(STEMI型)行PCI術(shù)前后IRI受多種基因的調(diào)控，包括氧化代謝應(yīng)激、熱休克、DNA損害和修復(fù)及凋亡信號(hào)相關(guān)基因，整體上了解到心肌缺血/