早期去勢(shì)對(duì)小鼠生長發(fā)育和不同組織基因表達(dá)譜的影響.pdf

1、去勢(shì)通常指通過機(jī)械切割或者免疫等方法使動(dòng)物失去性腺或使動(dòng)物性腺失去功能的過程。研究發(fā)現(xiàn)，去勢(shì)會(huì)導(dǎo)致脊椎動(dòng)物攻擊性降低，性欲減少，第二性征的發(fā)育受到抑制，甚至導(dǎo)致不孕不育和其他疾病的發(fā)生。去勢(shì)還會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)心肌細(xì)胞凋亡、肝中脂肪酸含量升高、肺水腫得到緩解等現(xiàn)象。因此，去勢(shì)對(duì)動(dòng)物的影響存在多組織效應(yīng)。目前有關(guān)去勢(shì)的研究多數(shù)停留在肉質(zhì)性狀、生長指標(biāo)、細(xì)胞形態(tài)等宏觀表型層面，或者檢測去勢(shì)對(duì)動(dòng)物體內(nèi)單個(gè)或者多個(gè)基因的影響，本實(shí)驗(yàn)以小鼠為動(dòng)物模型

2、，采用轉(zhuǎn)錄組測序的方法，研究早期（斷奶后）去勢(shì)對(duì)小鼠成年后不同組織的影響，研究結(jié)果如下:
　　(1)假去勢(shì)（陰囊處開個(gè)1cm左右小口）、單去勢(shì)（手術(shù)去除左側(cè)睪丸）和雙去勢(shì)（手術(shù)去除雙側(cè)睪丸）成年小鼠的血清睪酮濃度依次極顯著地降低。在飼養(yǎng)周期過程中，雙去勢(shì)小鼠成年體重顯著低于假去勢(shì)小鼠和單去勢(shì)小鼠。對(duì)小鼠11個(gè)屠宰測定指標(biāo)和13個(gè)衍生指標(biāo)的研究發(fā)現(xiàn)，6(42.86％)個(gè)測定指標(biāo)和9(69.23％)個(gè)衍生指標(biāo)在不同的處理組中存在顯著性

3、的差異。此外，早期去勢(shì)對(duì)成年后小鼠各組織產(chǎn)生了明顯的形態(tài)學(xué)、生理學(xué)和病理學(xué)的影響，如心肌細(xì)胞排列松散、肝細(xì)胞完整性降級(jí)甚至出現(xiàn)點(diǎn)狀壞死和肌纖維直徑縮小等。
　　(2)本研究對(duì)假去勢(shì)、單去勢(shì)和雙去勢(shì)小鼠的心、肝和骨骼肌共計(jì)27個(gè)樣本進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測序分析，共獲得159.05 Gb原始數(shù)據(jù)(raw data和156.75Gb的高質(zhì)量數(shù)據(jù)(clean data)，平均83.80％(89.88±1.51％)的clean data能夠匹配到小

4、鼠的參考基因組上。27個(gè)測序文庫共鑒定出18，870個(gè)表達(dá)的轉(zhuǎn)錄本，其中心臟10，005(53.02％)個(gè)，肝臟10，000(52.99％)個(gè)，骨骼肌10，002(53.00％)個(gè)。在心、肝和骨骼肌中分別得到7，397(73.93％)，6，700(67.00％)和8，402(84.00％)個(gè)有效的轉(zhuǎn)錄本。
　　(3)差異表達(dá)分析結(jié)果表明，假去勢(shì)和雙去勢(shì)小鼠之間的差異基因在心、肝和骨骼肌中分別為181、202和191個(gè)。心、肝和骨骼

5、肌特異表達(dá)基因數(shù)分別為143(79.01％)，183(90.59％)和155(81.15％)個(gè)。
　　(4)心臟組織中，假去勢(shì)和雙去勢(shì)之間的差異基因主要富集在細(xì)胞外基質(zhì)和焦點(diǎn)粘連相關(guān)的過程和通路中。細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)基因在心臟和骨骼肌組織中表達(dá)較高，且雙去勢(shì)的表達(dá)量低于假去勢(shì)。col3α1，col4α1和tek基因的表達(dá)量在不同組織之間存在組織差異性，且去勢(shì)對(duì)不同組織的col3α1，col4α1和tek基因的表達(dá)影響不同。
　　

6、(5)肝臟組織中，假去勢(shì)和雙去勢(shì)之間的差異基因主要富集在細(xì)胞色素P450參與的氧化還原反應(yīng)相關(guān)過程和通路中。氧化還原反應(yīng)相關(guān)基因在肝臟組織中的表達(dá)較高，除了Adh4基因外，其他基因都在雙去勢(shì)組表達(dá)量更高。gstt2，adh4和cyp2a5基因的表達(dá)量在不同組織之間存在組織差異性，且去勢(shì)對(duì)不同組織的gstt2，adh4和cyp2a5基因的表達(dá)影響不同。
　　(6)骨骼肌組織中，假去勢(shì)組的轉(zhuǎn)錄本中上調(diào)的差異基因富集多糖結(jié)合通路中。co