胰島素對大鼠血管平滑肌細胞RANKL表達影響及信號轉導機制的研究.pdf

1、第一章:胰島素促進大鼠體外鈣化型血管平滑肌細胞RANKL表達
　　 目的：本部分研究探討胰島素對大鼠體外鈣化型血管平滑肌細胞(calcifying vascular smooth muscle cells,CVSMCs)RANKL(receptoractivator of NF-kB Ligand，核因子kB配體的受體激動劑)表達的影響。
　　 方法：取不同濃度及時間點，用胰島素干預大鼠CVSMCs。應用RT-PCR和E

2、LISA方法分別測定CVSMCs RANKL mRNA和RANKL蛋白在大鼠CVSMCs的表達。
　　 結果：1．胰島素促進CVSMCs RANKL mRNA和RANKL蛋白的表達。2．胰島素呈時間依賴性CVSMCs RANKL mRNA表達。
　　 結論：胰島素促進大鼠CVSMCs RANKL表達。
　　
　　 第二章:胰島素激活ERKI/2信號途徑促進大鼠鈣化型血管平滑肌細胞RANKL表達
　

3、　 目的：在上部分研究發(fā)現，胰島素能夠促進大鼠體外CVSMCsRANKL表達，但其具體分子機制未明確。因此，本部分研究旨在探討胰島素促進大鼠CVSMCs RANKL表達的信號轉導機制。
　　 方法：胰島素以及聯合ERK1/2信號轉導阻斷劑PD98059、PI3K信號轉導阻斷劑LY294002和Akt信號轉導阻斷劑HIMO干預大鼠CVSMCs，利用Western Blot檢測p-ERKl/2，ERKl/2，p-Akt，Akt的表

4、達情況。胰島素以及聯合ERKl/2信號轉導阻斷劑PD98059、PI3K信號轉導阻斷劑LY294002和Akt信號轉導阻斷劑HIMO干預大鼠CVSMCs，利用RT-PCR技術檢測RANKL mRNA表達水平。
　　 結果：1．胰島素誘導大鼠CVSMCs ERKl/2以及Akt磷酸化。2.ERKl/2信號轉導阻斷劑PD98059干預組抑制胰島素促進大鼠CVSMCs RANKL mRNA表達增加效應，而PI3K信號轉導阻斷劑LY29