大麻素對大鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元上TRPV1受體的調(diào)制及其機制探討.pdf

1、第一部分
　　 盡管大麻素對TRPV1 受體的抑制作用可以解釋大麻素在外周的抗痛覺過敏和抗傷害感受效應，但大麻素抑制初級感覺神經(jīng)元上TRPV1 受體的機制目前還不清楚。因此,我們使用內(nèi)源性大麻素anandamide(AEA)和人工合成的大麻素WIN55,212-2(WIN)研究大麻素如何對三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元上TRPV1受體進行調(diào)制。首先，我們研究AEA和WIN對Icap 調(diào)制的濃度依賴性：此量效曲線呈“鐘”形，并且AEA和WIN對

2、Icap 調(diào)制的濃度閾值非常低（低于10-15 M）。AEA和WIN對Icap的最大抑制濃度分別為10-10M和10-9M，此時，AEA和WIN對Icap的最大抑制率分別為89±7.5％和95±1.6％。當AEA和WIN的濃度高于10-5M，AEA和WIN對Icap的抑制作用被完全翻轉(zhuǎn)。本實驗中，我們檢測了一些細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導通路來探究AEA和WIN對Icap的抑制作用的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導機制。我們發(fā)現(xiàn)，WIN對Icap的抑制作用可以被PKA系

3、統(tǒng)特異性拮抗劑H-89和KT5720完全翻轉(zhuǎn)。同樣，WIN對Icap的抑制作用也可被PKC系統(tǒng)特異性拮抗劑BIM和staurosporine完全翻轉(zhuǎn)。我們也發(fā)現(xiàn)PKG系統(tǒng)拮抗劑PKGi可部分翻轉(zhuǎn)WIN對Icap的抑制作用，而G蛋白系統(tǒng)拮抗劑GDP-βs和PLC拮抗劑U73122則不影響WIN對Icap的抑制作用。實驗表明細胞內(nèi)一些信號轉(zhuǎn)導通路，如PKA和PKC，參與了大麻素對Icap的抑制作用。
　　 第二章部分
　　

4、本實驗應用全細胞膜片鉗技術(shù)，在大鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元上探討滲透壓對5-HT3受體的調(diào)制作用。結(jié)果顯示：（1）實驗中大部分受檢細胞（75％）對胞外給予5－HT（3～300mM）敏感，可記錄到具有濃度依賴性的內(nèi)向電流，該電流可被5－HT3受體特異性拮抗劑ICS 205-930(1mM)阻斷。（2）實驗中反復給予100mM 5-HT，間隔3分鐘，發(fā)現(xiàn)5-HT3受體激活電流無衰減現(xiàn)象。（3）實驗中預加低滲細胞外液（260mOsm），對5-HT3受