PPARγ在上皮性卵巢癌的表達及其配體促凋亡作用機制初探.pdf

1、背景： 卵巢癌是我國常見的惡性腫瘤，是死亡率最高的婦科惡性腫瘤，探討卵巢癌藥物治療的機制，將為卵巢癌的臨床治療提供新的思路。過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators activated receptoigamma．PPAR γ)是核激素受體超家族中的成員，與配體結合可啟動核內(nèi)靶基因的轉錄，發(fā)揮重要的核轉錄因子功能。研究表明，PPARγ在人類多種腫瘤組織和細胞中高表達，如脂肪肉瘤、結腸癌、乳腺

2、癌、前列腺癌、肺癌和胃癌等，PPAR γ被其特異性配體激活后可抑制這些腫瘤細胞的生長、誘導腫瘤分化和凋亡，PPAR γ配體能實現(xiàn)以高效、低毒的選擇性藥物治療腫瘤，但用于上皮性卵巢癌治療的研究在國內(nèi)外尚未見報道。 目的： 本研究通過檢測PPAR γ在人正常卵巢和不同病理類型上皮性卵巢腫瘤組織中的表達，分析其臨床病理特征；研究在其配體羅格列酮(Rosiglitazone，RSG)激活下對人卵巢癌SKOV3細胞生長和凋亡的影響

3、；旨在探討其促凋亡作用機制。 方法： 采用免疫組織化學方法檢測70例上皮性卵巢癌組織和70例非癌(25例正常卵巢、25例良性上皮性卵巢腫瘤和20例交界性上皮性卵巢腫瘤)組織中PPAR γ的表達。MTT法測定羅格列酮對SKOV3細胞增殖的影響；流式細胞術檢測各組細胞凋亡率和細胞周期的變化；Hoechst33258熒光染色法觀察細胞凋亡形態(tài)學變化。熒光定量RT-PCR技術、免疫細胞化學方法檢測干預后細胞中PPAR γ、β-c

4、atenin、c-myc的mRNA和蛋白水平變化。 結果： 1．：PPAR γ在上皮性卵巢癌和非癌組織中均有表達，但癌組織中PPAR γ的表達高于非癌組織(P<0.01)；與正常卵巢相比，交界性上皮性卵巢腫瘤和上皮性卵巢癌PPARγ陽性表達率呈顯著升高，分別為20％、60％和72．86％(P<0.05)；上皮性卵巢癌與良性上皮性卵巢腫瘤(32％)比較亦有顯著性差異(P<0.01)；從正常卵巢組、良性上皮性卵巢腫瘤組、交界

5、性上皮性卵巢腫瘤組到上皮性卵巢癌組，PPAR γ陽性表達呈遞增趨勢(P<0.01)。 2．MTT法結果顯示：羅格列酮可抑制SKOV3細胞生長，并呈明顯的濃度-時間依賴方式。 3．流式細胞術結果顯示：羅格列酮能明顯誘導SKOV3細胞凋亡，在10、100 μ mol／L羅格列酮作用于SKOV3細胞24小時后，凋亡率分別為45.75％和51.97％，均明顯高于對照組(6.82％)，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；并使細胞周期

6、阻止于G<,1>期，呈濃度依賴方式。 4．Hoechst33258熒光染色顯示羅格列酮處理后的SKOV3細胞中出現(xiàn)凋亡小體。 5．免疫細胞化學和熒光定量RT-PCR結果顯示：人卵巢癌SKOV3細胞表達PPAR γ，羅格列酮作用于SKOV3細胞24小時后PPAR γ訓RNA和蛋白表達水平上調(diào)，而β-catenin、c-myc的mRNA和蛋白表達水平下調(diào)。 結論： 1．上皮性卵巢癌組織中PPAR γ的表達較

7、正常和良性腫瘤組織有顯著升高； 2．PPAR γ特異性配體具有抑制人卵巢癌SKOV3細胞生長和誘導凋亡作用，使細胞周期阻滯于G<,1>期； 3．羅格列酮對SKOV3細胞的生長抑制作用與活化PPAR γ、下調(diào)β-catenin、c-myc的mRNA和蛋白表達水平有關。 4．研究結果顯示PPAR γ與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展有關；經(jīng)羅格列酮干預后促進PPARγ表達、抑制SKOV3細胞生長，表明PPAR γ可能是卵巢癌基因治