胰腺癌細(xì)胞系中蛋白質(zhì)復(fù)合體研究.pdf

1、蛋白質(zhì)復(fù)合體是各種各樣生物學(xué)過程的基礎(chǔ)，廣泛深入地研究這些蛋白質(zhì)復(fù)合體對(duì)于揭示和建立蛋白質(zhì)的功能及調(diào)節(jié)的模型是非常重要的。胰腺癌是一種難以早期診斷、難以治愈、發(fā)病率逐年上升的高致死性癌癥。本研究，利用凝膠電泳結(jié)合質(zhì)譜的方法研究了不同胰腺癌細(xì)胞系中具有重要功能的蛋白質(zhì)復(fù)合體：20S蛋白酶體、熱休克蛋白相關(guān)蛋白質(zhì)復(fù)合體和14-3-3蛋白二聚體。哺乳動(dòng)物中，20S蛋白酶體的分子量約為700kDa，由28個(gè)分子量在21-34kDa之間，pI3-

2、10的亞基組成，其結(jié)構(gòu)為空心圓柱體結(jié)構(gòu)。在研究中，通過非變性凝膠電泳(CN-PAGE)及雙向凝膠電泳（2-DE）的分離以及質(zhì)譜鑒定得到SW1990、PANC-1、BxPC-3及CFPAC-1四株胰腺癌細(xì)胞系中20S蛋白酶體亞基及其亞型的信息，并且發(fā)現(xiàn)免疫亞基β1i和β2i在四株細(xì)胞系中的表達(dá)存在明顯差異。熱休克蛋白(HSPs)是一類在進(jìn)化上高度保守的蛋白質(zhì)家族。通過第一向的梯度非變性凝膠電泳(CN-PAGE)及第二向的SDS-PAGE的

3、分離結(jié)合質(zhì)譜鑒定，一系列的熱休克蛋白相關(guān)蛋白質(zhì)復(fù)合體得到分離和鑒定，并且發(fā)現(xiàn)在SW1990和PANC-1兩株胰腺癌細(xì)胞系中這些蛋白質(zhì)復(fù)合體的表達(dá)存在差異，大部分差異表達(dá)的蛋白質(zhì)是腫瘤相關(guān)蛋白，如HSP60，proteindisulfide-isomeraseA4(ERp72)和transitionalendoplasmicreticulumATPase(TERATPase)等。14-3-3蛋白是分子量在28-33kDa之間，存在于所有真