MCT1、CD147在人肝癌中的表達及其反義RNA表達載體對肝癌細胞的影響.pdf

1、目的：在體外試驗中使用CD147及MCT1反義RNA表達載體影響肝癌細胞表面MCT1的表達，觀察它對腫瘤細胞內(nèi)環(huán)境的干擾、對糖酵解代謝影響和抑制腫瘤細胞生長的作用。通過免疫組化方法檢測人肝癌中MCT1和CD147的表達，探討其表達與腫瘤臨床及病理學的關(guān)系。
　　 方法：體外實驗采用HEPG2人肝癌細胞株進行實驗。同時構(gòu)建MCT1及CD147的反義RNA表達載體，用于轉(zhuǎn)染HEPG2細胞株，HEPG2細胞分為未轉(zhuǎn)染組，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組和

2、轉(zhuǎn)染組，用western-blot方法檢測MCT1及CD147質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后對MCT1蛋白表達的影響，并用檢測各組細胞內(nèi)pHi及乳酸含量，繪制三組細胞的生長曲線并記錄各組生長數(shù)據(jù)，以上資料均作統(tǒng)計學分析。收集湘雅醫(yī)院2002年-2008年間60例肝癌手術(shù)切除標本，對照組50例為正常肝組織。將肝癌標本和對照正常肝組織標本制成石蠟切片并進行免疫組化染色，檢測不同病理級別及臨床分級肝癌組織標本和對照標本MCT1和CD147的表達水平。
　　

3、 結(jié)果：在細胞水平研究中，MCT1反義表達載體可抑制MCT1在細胞膜的表達，而CD147反義表達載體則可抑制MCT1在腫瘤細胞的功能，兩種載體轉(zhuǎn)染肝癌細胞后，均可引起腫瘤細胞pHi下降，細胞內(nèi)乳酸堆積，細胞的生長受到抑制。肝癌標本中均有MCT1和CD147高表達，且臨床病理級別高的肝癌組中二者表達水平低于于臨床病理級別低的肝癌組，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)論：運用MCT1及CD147反義RNA表達載體轉(zhuǎn)染肝癌細胞，可影響MC