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1、該研究共分三部分:第一部分髓鞘素的提取與鑒定,采用不連續(xù)梯度離心的方法從新鮮牛脊髓中提取髓鞘素,用SDS-PAGE分子量蛋白電泳和致敏豚鼠的方法檢測髓鞘素的主要成分和抗原活性,結(jié)果顯示,髓鞘素的主要成分為大分子量MBP,并具有很強的抗原活性;第二部分EAE動物模型的制備,以GPSCH為抗原,通過足底皮內(nèi)注射的方式致敏大鼠,成功地誘導(dǎo)出EAE模型;第三部分口服髓鞘素防治EAE及口服免疫耐受機制的研究,于免疫前7、5、2天、免疫日及免疫后2
2、、5、7天給大鼠口服髓鞘素,口服劑量為5mg/只/次,總量35mg/只,觀察動物發(fā)病情況,于免疫后第14天(PI14d),將動物全部處死,用RT-PCR半定量法,檢測外周淋巴細胞因子的表達情況,同時對中樞神經(jīng)系統(tǒng)進行常規(guī)HE染色、NADPH-d組化染色、原位細胞凋亡檢測,所得各項結(jié)果分別同對照組比較,并進行統(tǒng)計學(xué)處理.口服髓鞘素使大鼠體內(nèi)Th1型細胞因子表達水平下調(diào),Th2型細胞因子表達水平上調(diào),同時抑制CNS內(nèi)nNOS活性增加,從而在
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