星型多臂嵌段共聚物納米膠束給藥體系的研究.pdf

1、許多在體外實(shí)驗(yàn)中證明對(duì)癌細(xì)胞都具有良好抑制性的抗癌藥物，在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用中卻治療效果不顯著，且藥物毒性大。對(duì)藥物載體的研究幫助藥物準(zhǔn)確高效的送達(dá)病癥細(xì)胞，減少藥物對(duì)人體正常組織和細(xì)胞的毒副作用。納米膠束作為藥物載體，可用于疏水性抗癌藥物的靶向傳遞。本課題合成了星型4臂端氨基PLGA-PEG嵌段共聚物[4s-(PLGA-PEG-NH2)]，并用其制備包載疏水性抗癌藥物阿霉素(DOX)的納米膠束；考察了合成材料的理化性質(zhì)，膠束形態(tài)學(xué)特征

2、；通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)和比較人宮頸癌HeLa細(xì)胞對(duì)載阿霉素星型4臂端氨基PLGA-PEG納米膠束的攝取能力，用相同親疏水鏈段長(zhǎng)度的線性PLGA-PEG-PLGA(L-PLGA-PEG-PLGA)構(gòu)成的納米膠束作為對(duì)照，比較HeLa細(xì)胞對(duì)膠束載體的攝取能力，和兩種膠束載體對(duì)HeLa細(xì)胞的殺傷性，結(jié)果顯示4臂端氨基PLGA-PEG納米膠束更容易被HeLa細(xì)胞攝取，對(duì)HeLa細(xì)胞的殺傷能力更強(qiáng)。具體內(nèi)容分為以下三個(gè)部分：
　　 一、星

3、型4臂PLGA-PEG兩親性嵌段共聚物的合成與表征
　　 兩步法合成星型4臂端胺基PLGA-PEG兩親性嵌段共聚物：首先采用本體熔融聚合法合成4臂PLGA鏈段(4s-PLGA)，再采用DCC縮合法合成星型4臂端氨基PLGA-PEG兩親性嵌段共聚物。并通過(guò)核磁共振(1HNMR)和凝膠滲透色譜(GPC)對(duì)新合成得到的聚合物進(jìn)行化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)和相對(duì)分子質(zhì)量的表征。結(jié)果表明，所合成的聚合物符合設(shè)計(jì)的星型4臂結(jié)構(gòu)，嵌段共聚物中PLGA和P

4、EG鏈段的自身結(jié)構(gòu)沒(méi)有改變。
　　 二、載阿霉素星型4臂PLGA-PEG嵌段共聚物納米膠束的制備與表征
　　 采用乳液-溶劑揮發(fā)法制備阿霉素聚合物納米膠束。鹽酸阿霉素經(jīng)三乙胺脫鹽處理后為疏水性。先將阿霉素和星型4臂端氨基PLGA-PEG嵌段共聚物制成O/W單乳化體系，形成穩(wěn)定的乳液后，通過(guò)連續(xù)攪拌的方式除去有機(jī)溶劑。離心干燥后得到載阿霉素星型4臂PLGA-PEG兩親性嵌段共聚物納米膠束[DOX-loaded4s-(PLG

5、A-PEG-NH2)]。同時(shí)，用相同方法，將由相同親疏水鏈段長(zhǎng)度構(gòu)成的線性PLGA-PEG-PLGA兩親性嵌段共聚物制備為載阿霉素納米膠束[DOX-loadedL-(PLGA-PEG-PLGA)]作為對(duì)照。通過(guò)透射電鏡(TEM)考察并對(duì)比其形態(tài)特征；并對(duì)兩種膠束粒子的粒徑，zeta電位，載藥量和藥物包封率分別進(jìn)行了表征。結(jié)果表明，所制備的星型聚合物膠束粒子粒徑分布在(120±4.1)nm，zeta電位分布于(-17.6±0.87)mv，

6、載藥量（7.49±0.3）％，藥物包封率（75.2±3.2）%；線性聚合物膠束粒子粒徑分布在(91.28±2.3)nm，zeta電位分布于(-13.1±1.12)mv，載藥量（5.54±0.2）%，藥物包封率（57.3±2.8）%。
　　 三、載阿霉素星型4臂PLGA-PEG嵌段共聚物納米膠束的體外抗腫瘤作用
　　 采用HeLa細(xì)胞在體外評(píng)價(jià)載阿霉素星型4臂PLGA-PEG嵌段共聚物納米膠束的抗腫瘤作用。HeLa細(xì)胞與星

7、型4臂PLGA-PEG嵌段共聚物納米膠束、線性PLGA-PEG-PLGA納米膠束、和游離的阿霉素藥物分子，分別共同孵育6h和12h。細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)通過(guò)激光共聚焦顯微鏡觀察，結(jié)果顯示HeLa細(xì)胞對(duì)星型聚合物納米膠束的攝取明顯高于對(duì)線性聚合物納米膠束和游離DOX藥物分子的攝取。體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)表明，星型4臂聚合物納米膠束和由相同PLGA、PEG鏈段構(gòu)成的線性聚合物納米膠束相比，前者與對(duì)HeLa腫瘤細(xì)胞的殺傷作用更強(qiáng)。
　　 綜上所述，本