核糖體蛋白質(zhì)L15（RPL15）的高表達促進了胃癌細胞的增殖.pdf

1、背景: 胃癌是世界范圍內(nèi)第二常見的癌癥死亡原因。環(huán)境和遺傳因素在胃癌發(fā)生中都是很重要的因素。近年來，關(guān)于胃癌的分子特征的了解越來越多。同源染色體1，5，7，12，13和17位上雜合性的缺失(LOH)在胃癌中經(jīng)常出現(xiàn)?；虻淖兓?，致癌基因的激活和腫瘤抑制基因的失活在胃癌中經(jīng)常可見。致癌基因c-ras，c-erbB-2，K-sam，c-met和c-myc的突變或者擴增以及腫瘤抑制基因p53，結(jié)腸腺瘤息肉基因(APC)，結(jié)直腸癌刪除基

2、因(DCC)和視網(wǎng)膜母細胞瘤基因(RBI)的失活被認為與胃癌的發(fā)生有關(guān)。這些基因可能是潛在的預(yù)測胃癌進展和轉(zhuǎn)移的預(yù)后指標。 近來的研究顯示基因表達模式的綜合分析能從正常胃粘膜中識別胃癌的新的分子。這項技術(shù)也用來鑒別腫瘤亞群和鑒定與疾病分類、早期發(fā)現(xiàn)、預(yù)后以及胃癌進展有關(guān)的基因的表達。核糖體蛋白質(zhì)是核糖體的組成成分，在DNA修復(fù)、凋亡、耐藥、增殖中顯示了不同的功能。在我們以前的研究中，我們比較了兩種胃癌組織和同質(zhì)的非腫瘤組織中基因

3、的表達情況發(fā)現(xiàn)RPL15的表達水平在胃癌組織中比對照分別增加了2.8和4.7倍。RPL15還顯示在一些食管腫瘤中也比正常同質(zhì)組織中高表達。所以研究RPL15是否在胃癌中真正高表達和其在胃癌惡性表型中的作用是有意義的。在研究中，我們利用我們自己制備的多克隆抗體檢測了RPL15在胃癌組織和胃癌細胞系中的表達，探討了RPL15表達對于胃癌細胞系SGC7901的增殖的影響。 方法: 我們購買了Cybrdi公司的組織標本做RPL1

4、5的免疫染色，標本包括23張正常胃粘膜、胃腺癌和臨近的非腫瘤組織的切片。我院普外科12名手術(shù)患者的胃癌和臨近的非腫瘤組織用來做Westernblotting檢測。我們構(gòu)建了pSilencer-RPL15A和pSilencer-RPL15B質(zhì)粒，并用pSilencer-RPL15A，pSilencer-RPL15B或者空載體pSilencer3.1轉(zhuǎn)染SGC7901細胞，分別指定為SGC7901-L15AsiRNA，SGC7901-L15

5、BsiRNA和SGC7901-pcDNA。通過westernblot分析轉(zhuǎn)染后SGC7901細胞中RPL15水平，通過MTT和流式細胞分析研究了轉(zhuǎn)染pSilencer-RPL15A后SGC7901細胞的增殖情況。并通過Westernblot研究細胞周期蛋白D1和B1與RPL15異位表達的關(guān)系。我們還通過軟瓊脂克隆基因分析和裸鼠皮下致瘤試驗評價了轉(zhuǎn)染后SGC7901細胞體內(nèi)外致腫瘤性的變化。 結(jié)果: RPL15在胃癌組織中

6、顯著地高表達，而且RPL15在胃癌細胞系A(chǔ)GS，MKN45，MKN28，SGC7901和KATOⅢ中也高表達。通過轉(zhuǎn)染siRNA載體抑制RPL15的表達明顯地抑制了SGC7901細胞的生長，而且和細胞周期調(diào)節(jié)蛋白D1和B1的表達無關(guān)。下調(diào)RPL15的表達抑制了SGC7901細胞在軟瓊脂的生長和在裸鼠皮下的致腫瘤性。 結(jié)論: RPL15在胃癌組織和細胞系中高表達，在胃癌細胞的增殖中發(fā)揮著作用。所以RPL15可能是胃癌抗癌治