ICD對肝細胞癌側(cè)群細胞增殖抑制及其機制研究.pdf

1、肝細胞癌中的側(cè)群細胞是一類高度耐藥細胞群，對多種常規(guī)腫瘤化療藥物不敏感，研究靶向側(cè)群細胞的藥物有助于提高肝細胞癌對化療藥物的敏感性。異紫堇定堿（Isocorydine，ICD）是一種潛在的抗腫瘤天然生物堿，本研究首次發(fā)現(xiàn)ICD可以顯著降低肝細胞癌細胞系中側(cè)群細胞的比例，從而增加肝癌細胞對傳統(tǒng)化療藥物如阿霉素(Doxorubicin，DXR)等的敏感性，阿霉素的細胞外排與細胞內(nèi)滯留實驗表明ICD不僅可以增加肝癌細胞對阿霉素的攝入，還減少了

2、細胞對阿霉素的外排，尤其是延長了阿霉素在核內(nèi)的滯留時間。BrdU摻入實驗顯示與非側(cè)群細胞相比，ICD對側(cè)群細胞有選擇性增殖抑制作用。處理早期，ICD通過引起細胞周期G2/M期阻滯抑制側(cè)群細胞的生長，后期則誘導側(cè)群細胞的凋亡，同時蛋白印跡檢測結(jié)果顯示ICD改變了多個凋亡相關(guān)基因的表達:活化了capase家族的caspase-9、caspase-8和caspase-12;激活了細胞膜和線粒體膜上凋亡調(diào)節(jié)蛋白，上調(diào)死亡受體Fas以及Bcl-2

3、家族的抗凋亡成員如Bad、Bax、Bak和Bim的蛋白表達，下調(diào)了Bcl-2家族的抗凋亡成員Bcl-2的蛋白表達。免疫缺陷小鼠移植瘤試驗結(jié)果進一步證明ICD選擇性地降低了側(cè)群細胞形成的皮下移植瘤的體積和重量，因此ICD可能是一個靶向肝癌側(cè)群細胞的候選藥物。程序性細胞死亡蛋白4是一個抑癌基因并與凋亡密切相關(guān)，與非側(cè)群細胞相比，程序性細胞死亡蛋白4在側(cè)群細胞中表達水平較低。而ICD處理后，側(cè)群細胞中程序性細胞死亡蛋白4表達明顯上調(diào)，體內(nèi)移植