痹祺膠囊組方配伍對(duì)細(xì)胞色素P450同工酶活性的影響.pdf

1、研究目的：痹祺膠囊是應(yīng)用現(xiàn)代藥物制劑理論精制而成的新藥，主要用于風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，頸椎病、肩周炎等疾病的治療。具有療效好、見(jiàn)效快、止痛作用好的特點(diǎn)。目前對(duì)于痹祺膠囊組方配伍的科學(xué)性及用藥安全性尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)是國(guó)家自然科學(xué)基金委重點(diǎn)項(xiàng)目(No.30630075)的重要組成部分，通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)兩方面全面評(píng)價(jià)痹祺膠囊配伍組方的基于細(xì)胞色素P450(Cytochrome P450，CYP450)的安全性和科學(xué)性。
　　

2、研究方法：采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)建立同時(shí)評(píng)價(jià)CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A酶活性的全新高通量分析方法，同時(shí)提取并檢測(cè)5種特異性探針?biāo)幬锛捌湎鄳?yīng)代謝產(chǎn)物，其中包括非那西丁/撲熱息痛、甲苯磺丁脲/4-羥基甲苯磺丁脲/羧基甲苯磺丁脲、4'-羥基美芬妥英、右美沙芬/右啡烷、咪達(dá)唑侖/1'-羥基咪達(dá)唑侖。采用Gentest高通量重組CYP450酶抑制劑篩選試劑盒分別考察痹祺全藥提取物、君

3、藥有效成分馬錢(qián)子堿和士的寧及其與使藥甘草的有效成分甘草酸和甘草次酸相結(jié)合對(duì)以上5種CYP450的體外抑制作用。采用“Cocktail”一點(diǎn)法測(cè)定痹祺膠囊配伍組分對(duì)Wistar大鼠體內(nèi)5種CYP450的誘導(dǎo)和(或)抑制作用，并全面分析配伍規(guī)律。
　　 結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)建立了全新“Cocktail”探針?biāo)幬锝M合(非那西丁+甲苯磺丁脲+美芬妥英+右美沙芬+咪達(dá)唑侖)，并建立了同時(shí)檢測(cè)以上五種探針?biāo)幬锛捌湎鄳?yīng)代謝產(chǎn)物的LC-MS/MS分析方

4、法。馬錢(qián)子堿和士的寧對(duì)5種CYP450基本沒(méi)有體外抑制作用。馬錢(qián)子堿和士的寧分別加上甘草酸和甘草次酸后對(duì)CYP2C9和CYP2C19可能存在體外抑制作用。大鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，痹祺膠囊組方存在基于CYP450的配伍規(guī)律，與空白對(duì)照組比較，君藥+臣藥組、君藥+使藥組、君藥+臣藥+佐藥組、君藥+臣藥+使藥組、君藥+佐藥+使藥組及痹祺膠囊全藥組對(duì)CYP1A2具有顯著誘導(dǎo)作用；君藥+臣藥組、君藥+臣藥+佐藥組、君藥+臣藥+使藥組及痹祺膠囊全藥組