運動性疲勞對大鼠骨骼肌蛋白質(zhì)組表達譜影響的研究.pdf

1、分析運動疲勞對大鼠大腿骨骼肌蛋白組表達譜的影響，尋找新的與運動疲勞相關(guān)的蛋白質(zhì)，以期對運動疲勞的產(chǎn)生機制作進一步的探討。 方法： 本研究采用比較蛋白質(zhì)組學(xué)方法，研究運動疲勞對大鼠后肢大腿骨骼肌蛋白質(zhì)組表達譜的影響。以游泳方式建立大鼠運動疲勞模型，利用動物行為學(xué)和生物化學(xué)方法對模型的可信度進行驗證。 建模結(jié)束后，研磨法提取蛋白質(zhì)，用Lowry法測定蛋白總量，進行二維電泳分離，通過計算機圖像分析，尋找差異性蛋白質(zhì)，將

2、差異性蛋白質(zhì)點分別進行質(zhì)譜分析，經(jīng)數(shù)據(jù)庫查詢，初步鑒定出這些差異蛋白。 研究結(jié)果： 1．利用動物行為學(xué)和生物化學(xué)方法對運動模型進行觀察、檢測。發(fā)現(xiàn)大鼠神情倦怠，雙眼暗淡無光，皮毛蓬亂枯槁，片狀脫落，食欲下降，對外界刺激反應(yīng)遲鈍，逃避和探究行為減少，運動能力下降，體重減輕，第7天和第10天較對照組明顯下降，存在顯著性差異。大鼠血尿素含量即刻組和12小時組與對照組相比增高，存在差異。 結(jié)果提示：大鼠十天遞增負荷游泳運

3、動造成的動物疲勞狀態(tài)與運動員生化指標變化基本相似，說明本實驗提供的動物模型是可靠的。 2．經(jīng)二維電泳分離，以及計算機圖像分析，發(fā)現(xiàn)：在實驗組有12個蛋白發(fā)生明顯的變化(蛋白質(zhì)濃度相差3倍以上)，其中9個蛋白質(zhì)表達下調(diào)，3個蛋白質(zhì)表達上調(diào)。 3．經(jīng)質(zhì)譜分析，數(shù)據(jù)庫查詢，初步鑒定出這些差異蛋白： (1)3個表達上調(diào)的蛋白質(zhì)中有兩個是同一個蛋白質(zhì)--肌球蛋白巰解輕鏈，另一個是肌球蛋白輕鏈1，都屬于肌球蛋白輕鏈；

4、 (2)9個表達下調(diào)的蛋白質(zhì)：三磷酸甘油醛脫氫酶，β-烯醇化酶，肌酸激酶M鏈，ATP-AMP轉(zhuǎn)化酶，肌球蛋白重鏈，肌動蛋白，快速骨骼肌型肌鈣蛋白I，快速骨骼肌型肌鈣蛋白T，未知蛋白RIKEN cDNA 1700001F09[Mus musculus]。 結(jié)論： 1、十天遞增負荷游泳運動所建的運動疲勞模型，動物行為學(xué)特征和生化指標與運動員在運動中出現(xiàn)的運動疲勞狀態(tài)時的特征相吻合，說明本實驗所建立的運動疲勞模型是可靠的。

5、 2、表達下調(diào)的蛋白質(zhì)中，4個酶(GAPDH；M-CK；Beta enolase；ATP-AMP轉(zhuǎn)化酶)與運動疲勞時骨骼肌能量代謝失衡，代謝產(chǎn)物堆積以及機體的調(diào)節(jié)失衡有關(guān)。4個是骨骼肌收縮蛋白(MHC；actin；fsTnl；TnTF)，可能是長時間劇烈運動導(dǎo)致骨骼肌蛋白質(zhì)降解增加。另外一個是RIKEN cDNA 1700001F09是新蛋白，目前尚未報道。表達上調(diào)的蛋白質(zhì)(MLC<,1>、DTNB)，可能與運動疲勞時機體酸性代謝產(chǎn)