MIF和TNF-A啟動(dòng)子區(qū)基因多態(tài)性與胃癌易感性.pdf

1、背景和目的：胃癌(gastric cancer)是常見的惡性消化道腫瘤之一,其死亡率是繼肺癌之后的第二位,在中國胃癌是第三位常見腫瘤。胃癌的發(fā)病機(jī)制與多種因素有關(guān),常見的因素有:幽門螺桿菌感染(Helicobacter pylori,H.pylori)、遺傳因素、環(huán)境因素、飲食、社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況等。在中國人群中的H.pylori的感染率達(dá)到60％以上,但是在所有的H.pylori感染者中只有不到3％的人最終發(fā)展為胃癌,這說明胃癌的發(fā)生還和感

2、染因素之外的其他因素有關(guān)。近年來,多項(xiàng)研究結(jié)果顯示胃癌與炎性因子基因多態(tài)性有關(guān),對(duì)炎性因子基因多態(tài)性、家族聚集性和種族差異等方面的研究說明遺傳因素在胃癌的致病機(jī)理方面有著重要的作用。巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)移抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)和腫瘤壞死因子-α(Tumornecrosis factor-α,TNF-α)作為兩種重要的炎性因子,它們的基因多態(tài)性和很多疾病易感性有關(guān),但其和胃癌

3、關(guān)系的研究報(bào)道尚不多見。通過家系研究分析胃癌的家族聚集性及胃癌的遺傳易感性隨著家庭成員親屬關(guān)系的變化而變化的報(bào)道亦不多見。研究MIF及TNF-A啟動(dòng)子區(qū)基因多態(tài)性和胃癌遺傳易感性的關(guān)系,為胃癌的病因?qū)W研究提供線索,一方面可對(duì)胃癌進(jìn)行更準(zhǔn)確的分子分型診斷,另一方面可能為治療預(yù)后分析提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本次研究通過在胃癌病例家系及相應(yīng)對(duì)照家系不同親屬成員中MIF和TNF-A各基因型的分布,及其與幽門螺桿菌感染在胃癌發(fā)生中的交互作用,揭示胃癌發(fā)生過

4、程中遺傳因素的作用,探討并驗(yàn)證炎性因子基因多態(tài)性與我國胃癌遺傳易感性的關(guān)系。
　　方法：本研究采用家系研究的方法,在河南省胃癌高發(fā)區(qū)新鄉(xiāng)和新安兩個(gè)縣共四個(gè)鄉(xiāng)(鎮(zhèn))進(jìn)行整群抽樣,胃癌病例家系是由先證者本人及一級(jí)與二級(jí)親屬成員組成,共296人;對(duì)照家系共319人,搜集兩組家系人群的基線資料,所有研究對(duì)象既往無糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、關(guān)節(jié)炎、炎性腸病等自身免疫性疾病史。抽取研究對(duì)象外周靜脈血-80℃超低溫保存?zhèn)溆?。利用所有研究?duì)象外周靜

5、脈血提取基因組DNA,采用聚合酶鏈反應(yīng)—限制性片段長度多態(tài)性(Polymerase chain reaction-restriction fragment lengthpolymorphisn,PCR-RFLP)實(shí)驗(yàn)方法,通過瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠垂直電泳檢測MIF基因-173位點(diǎn)、TNF-A基因-238位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性;用卡方檢驗(yàn)比較各基因型在胃癌病例家系成員和對(duì)照家系成員間及其一級(jí)與二級(jí)親屬成員中的分布頻率;采用酶聯(lián)免疫

6、吸附試驗(yàn)法(Enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)檢測上述人群的H.pylori感染情況并運(yùn)用卡方檢驗(yàn)比較H.pylori感染率在一級(jí)與二級(jí)親屬間的分布差異;運(yùn)用LDA軟件對(duì)TNF-A-308及TNF-A-238進(jìn)行連鎖不平衡(Linkage disequilibrium,LD)分析;采用相乘模型判斷MIF-173、TNF-A-238的基因多態(tài)性和H.pylori感染是否存在交互作用,似然比檢驗(yàn)用

7、于分析交互是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：1.通過對(duì)MIF-173和TNF-A-238多態(tài)性位點(diǎn)基因型分布與胃癌關(guān)系的分析可知,MIF-173C/C基因型是胃癌的危險(xiǎn)因素,OR值為2.59(95％CI:1.27~5.26)、比較其在胃癌病例一級(jí)親屬和對(duì)照一級(jí)親屬間的分布,OR值分別是8.20(95％CI:2.34~28.68)和2.08(95％CI:0.57~7.57),說明危險(xiǎn)性隨著研究對(duì)象血緣關(guān)系的疏遠(yuǎn)而減弱;TNF-A-23

8、8G/A基因型與是胃癌易感性不存在關(guān)聯(lián),TNF-A-238A/A基因型在本次研究中并沒有被發(fā)現(xiàn)。2.TNF-A-238的基因多態(tài)性在胃癌病例家系和對(duì)照家系間的分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)TNF-A-308和TNF-A-238兩個(gè)基因位點(diǎn)的基因型聯(lián)合分析可知,六種聯(lián)合基因型中GA/GG、AA/GG、和AA/GA三種聯(lián)合基因型對(duì)胃癌的危險(xiǎn)度都大于1,在病例家系和對(duì)照家系比較的OR值分別為2.07(1.34~3.21)、4.49(2.74~7.3

9、3)、4.98(1.76~14.01)。3.H.pylori感染是胃癌的危險(xiǎn)因素,病例和對(duì)照比較其OR值在一級(jí)親屬間為1.96(95％CI:1.26~3.01),在二級(jí)親屬間為0.94(95％CI:0.49~1.81),危險(xiǎn)性隨著血緣關(guān)系的疏遠(yuǎn)而減弱。4.MIF-173和TNF-A-238兩位點(diǎn)基因多態(tài)性與H.pylori感染情況的交互作用分析,結(jié)果顯示H.pylori感染和TNF-A-238位點(diǎn)突變基因型交互后可以增加罹患胃癌的發(fā)病風(fēng)

10、險(xiǎn),而和MIF-173位點(diǎn)突變基因型交互后不能增加胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　結(jié)論：1.MIF-173位點(diǎn)C/C基因型是胃癌的危險(xiǎn)因素,并與胃癌的關(guān)系隨著家庭成員血緣關(guān)系的疏遠(yuǎn)而逐漸減弱。2.聯(lián)合基因型GA/GG、AA/GG和AA/GA是胃癌的危險(xiǎn)基因型,攜帶這三種聯(lián)合基因型的人群罹患胃癌的風(fēng)險(xiǎn)高于正常人群。3.H.pylori感染受遺傳因素和(或)家族內(nèi)傳播的影響,隨親屬關(guān)系降低感染率降低,是胃癌的危險(xiǎn)因素。4.H.pylori感染與