體外模擬CO-,2-氣腹對(duì)人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞生長(zhǎng)的影響.pdf

1、背景:
　　 近年來,腹腔鏡手術(shù)在腹部外科方面得到了迅速的發(fā)展,不斷涌現(xiàn)出關(guān)于腹腔鏡手術(shù)治療不同惡性腫瘤的報(bào)道,尤以結(jié)直腸癌腹腔鏡手術(shù)切除的報(bào)道為多。腹腔鏡手術(shù)主要是通過CO2氣體建立氣腹,然后通過器械進(jìn)行手術(shù)操作。隨著腹腔鏡手術(shù)技術(shù)的提高以及手術(shù)器械的更新,更有力地推動(dòng)了腹腔鏡手術(shù)的發(fā)展。腹腔鏡手術(shù)具有手術(shù)創(chuàng)傷小、出血量少、術(shù)后疼痛輕、術(shù)后康復(fù)快、可早期恢復(fù)活動(dòng)和進(jìn)食、免疫功能損傷較輕、術(shù)后并發(fā)癥少、留院時(shí)間短、腹部外觀美等優(yōu)

2、點(diǎn),并且已得到公認(rèn),使其應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,已廣泛應(yīng)用于臨床。最近,有不少報(bào)道認(rèn)為在5年生存率上,腹腔鏡結(jié)腸癌切除術(shù)與傳統(tǒng)開腹手術(shù)有著相同的療效,認(rèn)為腹腔鏡結(jié)腸癌切除術(shù)是安全的、可行的。
　　 但對(duì)腹腔鏡CO2氣腹是否會(huì)促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖,尚有爭(zhēng)議。以往有學(xué)者通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)認(rèn)為CO2氣腹會(huì)促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的增長(zhǎng),但也有人得出CO2氣腹不會(huì)促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的增長(zhǎng)或抑制其增長(zhǎng)的結(jié)論。造成這兩種截然相反實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因?yàn)榭赡苁且驗(yàn)椴煌脑囼?yàn)動(dòng)物

3、對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的反應(yīng)性不同,試驗(yàn)動(dòng)物個(gè)體之間存在差異性,另外在建立試驗(yàn)動(dòng)物模型時(shí)操作方法的不同,這些都為試驗(yàn)的結(jié)果增加了不穩(wěn)定因素。倘若通過體外模擬CO2氣腹環(huán)境進(jìn)行結(jié)腸癌細(xì)胞培養(yǎng),然后觀察其對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,將可以避開這些不穩(wěn)定因素,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具有說服力。
　　 目的:
　　 通過建立體外模擬CO2氣腹環(huán)境,研究CO2氣腹對(duì)人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
　　 方法：
　　 采用由(中科院上海

4、細(xì)胞庫)提供的SW480結(jié)腸癌細(xì)胞株。以RPMI1640培養(yǎng)液+5％小牛血清作為培養(yǎng)液,常規(guī)放入37℃,5％CO2恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行增值培養(yǎng)。建立體外模擬CO2氣腹環(huán)境,在全自動(dòng)氣腹機(jī)作用下維持密閉培養(yǎng)箱內(nèi)壓力分別為9mmHg、12 mmHg、15 mmHg,持續(xù)時(shí)間分別為1h、2h、4 h。在處理后第12小時(shí)通過流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞周期變化；分別在處理后12h、24h、36h、48h、60h和72h用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況；分別在處理后

5、0h、0.5h、1h、1.5h、2h和2.5h通過電子PH計(jì)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液PH值的變化。
　　 結(jié)果：
　　 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果顯示,CO2氣腹組G0/G1期細(xì)胞比例與對(duì)照組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖結(jié)果顯示,各氣腹組人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的平均D(490)值均低于對(duì)照組,且(9mmhg-4h、12mmhg-4h、15mmhg-2h)氣腹組在第24h-36h,(15mmhg-4h

6、)氣腹組在第24h-60h的人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的平均D(490)值與對(duì)照組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；電子PH計(jì)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液PH值結(jié)果,9mmhg-1h氣腹組在第0h-2h細(xì)胞培養(yǎng)液的PH值與對(duì)照組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在處理后第2.5 h時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液PH值與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),CO2氣腹組(9mmhg-2h、9mmhg-4h、12mmhg-1h、12mmhg-2h、12m