實驗性血管性認知障礙關于膽堿能機制的研究.pdf

1、分類號：R743密級：學位類別：科學學位口專業(yè)學位口學校代碼：10062學號：2010601055學科門類：醫(yī)學又坪眚科鼻號博士學位論文DoCToRALDISSERTATIoN論文題目：實驗性血管性認知障礙關于膽堿能機制的研究TITLETheresearchofcholinergiedeficiencymechanismintheexperimentalvascularcognitiveimpairment一級學科：臨床醫(yī)學二級學科：神

2、經(jīng)病學論文作者：孫亞男指導教師：程焱導師組成員：郝峻巍教授教授天津醫(yī)科大學研究生院二o～四年五月天津醫(yī)科大學博士學位論文中文摘要背景和目的：目前諸多研究證明中樞膽堿能機制參與了VaD的發(fā)病。膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CHAT)、乙酰膽堿酯酶(ACHE)，囊泡乙酰膽堿轉(zhuǎn)運體(VACHT)是膽堿能系統(tǒng)的重要組成部分，維持著乙酰膽堿(ACH)的動態(tài)平衡。本文將探索VaD大鼠空間學習記憶能力的變化及其海馬CHAT、ACHE、VACHT蛋白表達的變化，并觀

3、察不同作用機制的藥物鹽酸多奈哌齊、丁苯酞(NBP)、紅花黃色素(HSYO)、芬戈莫德(FTY720)對VaD大鼠空間學習記憶能力和海馬BDNF、VEGF、CHAT、ACHE、VACHT的影響，從而為VaD的藥物治療提供多方向新的靶點和理論依據(jù)。方法：本實驗采用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法(2VO)建立VaD大鼠模型，運用水迷宮方法檢測VaD大鼠的空間學習記憶能力，首次同時應用westernblot方法、免疫熒光染色檢測VAD大鼠海馬CHAT、AC

4、HE、VACHT的蛋白表達，來觀察膽堿能機制與VaD的關系。并應用丁苯肽、紅花黃色素、FTY720對VAD大鼠進行干預，同時應用westernblot方法、免疫組化染色或免疫熒光染色的方法，以及RealTimePCR方法，首次檢測上述藥物對大鼠海馬CHAT、ACHE、VACHT、VEGF、BDNF表達的影響，觀察上述藥物對VaD大鼠膽堿能系統(tǒng)和空間學習記憶能力的影響。結(jié)果：1：11模型組大鼠每日的逃避潛伏期均比丁F常組(C組)和假手術組

5、(S組)明顯延長(PO05)。模型組大鼠目標象限百分率明顯低于正常組和假手術組(尺005)。12模型組大鼠海馬區(qū)CHAT、ACHE、VACHT蛋白表達與正常對照和假手術比較明顯下調(diào)。13HE染色：正常組和假手術組大鼠海馬區(qū)細胞邊界清楚，胞質(zhì)呈淡紅色，胞核呈藍色，突起整齊排列于福射層，高倍鏡下可見部分核仁。VaD模型組大鼠海馬CAI區(qū)細胞層數(shù)和數(shù)量減少，排列紊亂，細胞體積明顯縮小，部分細胞呈空泡樣變，大量細胞發(fā)生死亡，可見核固縮、核破裂，