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文檔簡介
1、目的:胰腺是集內(nèi)分泌和外分泌于一體的實質(zhì)性器官,表面有腹膜覆蓋。目前,關(guān)于胰島多肽激素的釋放方式和轉(zhuǎn)運途徑,尚存在不同觀點;明確這一問題,對于防治糖尿病等內(nèi)分泌及代謝性疾病,具有臨床指導(dǎo)意義。本課題擬對大鼠胰腺組織及其腹膜的結(jié)構(gòu)特點,進行光鏡和電鏡觀察,探討胰腺內(nèi)、外分泌部在形態(tài)學(xué)方面的相關(guān)性,以及胰腺與腹膜腔的關(guān)系,揭示胰腺脈管系統(tǒng)的構(gòu)筑特點,為胰島多肽激素的釋放方式和在細胞外正常轉(zhuǎn)運途徑的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),提供形態(tài)學(xué)方面的依據(jù)。 方
2、法:(1)選用健康成年SD大鼠,麻醉后取胰腺組織,做冷凍切片,進行蘇木精-伊紅(HE)染色、相鄰切片的5'-核苷酸酶和堿性磷酸酶(5'-Nase-ALPase)酶組織化學(xué)雙重染色,應(yīng)用光鏡觀察胰腺組織及其腹膜的細微結(jié)構(gòu),以及胰腺內(nèi)脈管系統(tǒng)的構(gòu)筑特點。 (2)制備透射電鏡(TEM)樣品,應(yīng)用TEM觀察胰腺組織及其腹膜的超微結(jié)構(gòu),辨別胰島細胞和毛細血管的類型,尋找毛細淋巴管,確定多肽激素分泌顆粒的分布情況,在血管周隙和組織間隙內(nèi),尋
3、找完整的膜包分泌顆粒。 (3)制備掃描電鏡(SEM)樣品,應(yīng)用SEM觀察胰腺腹膜表面的結(jié)構(gòu)特點;對經(jīng)二甲基亞砜(DMSO)冷凍割斷法處理的樣品,觀察胰腺組織及其腹膜間皮細胞下結(jié)締組織纖維的構(gòu)筑特征。結(jié)果:(1)光鏡觀察顯示,大鼠胰腺腹膜表面被覆一層扁平的間皮細胞,間皮細胞的深面為疏松結(jié)締組織。在胰腺小葉之間的結(jié)締組織內(nèi),穿行有血管、淋巴管和小葉間導(dǎo)管等結(jié)構(gòu)。胰腺小葉主要由腺泡構(gòu)成,在腺泡之間散布大小不等的胰島,胰腺小葉內(nèi)可見血管
4、、淋巴管和小葉內(nèi)導(dǎo)管等結(jié)構(gòu)相互伴行;在胰島內(nèi)部和腺泡之間,存在豐富的毛細血管,胰島內(nèi)部無毛細淋巴管,但是,胰島與其周圍的淋巴管關(guān)系較為密切。 (2)透射電鏡觀察揭示,在胰腺腹膜的表面,有一層扁平的間皮細胞,細胞核呈長橢圓形,細胞質(zhì)很薄。間皮細胞深面為疏松結(jié)締組織,內(nèi)含大量的膠原纖維,并有血管、淋巴管和神經(jīng)纖維等穿行其中。胰腺的腺泡細胞呈錐體形,大量的酶原顆粒位于近細胞頂部(靠腺泡腔)的胞質(zhì)內(nèi),直徑600~900nm。腺泡腔由單層
5、腺泡細胞圍成,腔內(nèi)還可觀察到泡心細胞。在胰島細胞與相鄰的腺泡細胞之間,存在寬窄不等的縫隙,可見成纖維細胞和膠原纖維,但無明顯的結(jié)締組織被膜分隔。在胰島細胞之間,可見細胞間小管,細胞間小管內(nèi)存在有形成分。在胰島B細胞的細胞質(zhì)內(nèi),存在大量的分泌顆粒,呈圓球形,直徑為200~450nm,有界膜包被,界膜的內(nèi)部有電子密度較高的芯,芯的形態(tài)及大小不一,芯與界膜之間的間隙較寬,呈現(xiàn)清亮的環(huán)形暈狀。在胰島A細胞的細胞質(zhì)內(nèi),其分泌顆粒呈圓形或卵圓形,直
6、徑為200~350nm,界膜內(nèi)部芯的電子密度比B細胞的高,芯與界膜之間的間隙較窄,故環(huán)形暈不明顯。在腺泡之間和胰島內(nèi)部,均有豐富的有孔型毛細血管,孔徑30~50nm。但是,淋巴管和毛細淋巴管存在于胰島周圍,在胰島內(nèi)部未觀察到淋巴管。在胰島細胞周圍的組織間隙、血管周隙以及毛細血管的內(nèi)皮細胞內(nèi),觀察到膜包分泌顆粒,而且與胰島細胞內(nèi)的分泌顆粒極為相似。 (3)常規(guī)掃描電鏡觀察表明,被覆于胰腺的腹脫間皮細胞,為多邊形扁平細胞,間皮細胞的游離面布
7、有微絨毛。在多個扁平間皮細胞的交匯處,形成大小不等、形狀不規(guī)則的孔隙,內(nèi)徑約為1.5~2μm。但是,在大鼠的胰腺腹膜表面,未觀察到立方形間皮細胞和腹膜淋巴孔樣的結(jié)構(gòu)。對經(jīng)過二甲基亞砜冷凍割斷法處理的樣品,掃描電鏡觀察表明,間皮下基質(zhì)中存在大量的膠原纖維和網(wǎng)狀纖維,在腺泡之間的結(jié)締組織內(nèi),存在神經(jīng)纖維和管道樣結(jié)構(gòu),腺泡細胞內(nèi)可見細胞核及酶原顆粒。 結(jié)論: (1)在胰島細胞與腺泡細胞之間,無明顯的結(jié)締組織被膜分隔;但是,存在
8、神經(jīng)、血管和淋巴管,表明胰腺內(nèi)、外分泌部之間,具有結(jié)構(gòu)上的直接相關(guān)性。 (2)在腺泡之間和胰島內(nèi)部,存在豐富的有孔型毛細血管;但是,毛細淋巴管只見于胰島的周圍。胰島的淋巴引流,可能是通過淋巴管前通路實現(xiàn)的。 (3)在胰島細胞周圍的組織間隙、血管周隙以及毛細血管內(nèi)皮細胞內(nèi),均存在膜包分泌顆粒,并與胰島細胞內(nèi)的分泌顆粒極為相似;提示胰島細胞多肽激素的外排形式,存在連同顆粒被膜的整體釋放;毛細血管的內(nèi)皮細胞,可能通過吞飲方式,
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