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1、目的:觀察不同負壓模擬罐法對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞的增殖和遷移的變化以及從血管內(nèi)皮細胞分泌的血管舒縮物質(zhì):前列環(huán)素、內(nèi)皮素和血栓調(diào)節(jié)蛋白的變化,說明拔罐“活血行氣、活血化瘀”的細胞生物學(xué)機制。
方法:選擇指數(shù)期生長的相對穩(wěn)定的第五代或第六代人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞,將其接種到自行設(shè)計的彈性血管模型中培育,待其完全貼壁后分組:對照組(一個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓)、低負壓(-40kPa)和高負壓組(-80kPa),對照組放在培養(yǎng)箱培養(yǎng),負壓組放入模
2、擬罐法的負壓環(huán)境中并進行持續(xù)穩(wěn)定的負壓干預(yù)。通過繪制細胞生長曲線和MTT檢測方法反映細胞增殖的水平,通過細胞劃痕實驗反映細胞遷移和修復(fù)的水平,通過酶聯(lián)免疫吸附測定法測定模擬罐法不同負壓,細胞所分泌的前列環(huán)素、內(nèi)皮素和血栓調(diào)節(jié)蛋白的水平,反映模擬罐法負壓對人臍靜脈內(nèi)皮細胞血管舒縮物質(zhì)的影響和調(diào)控。
結(jié)果:通過觀察模擬罐法負壓下的細胞并與對照組相比較,負壓組的細胞生長速度比對照組快;MTT檢測的細胞吸光值(490nm),負壓組比空
3、白對照組顯著增加(P<0.01),高負壓組的吸光值高于低負壓組(P<0.05)。細胞劃痕實驗中,負壓組細胞遷移修復(fù)劃痕的能力高于對照組(P<0.01),負壓組的細胞遷移率高于空白對照組(P<0.01),高負壓組細胞遷移率比低負壓組高(P<0.01)。與空白對照組相比,負壓組都能夠促進細胞分泌前列環(huán)素、內(nèi)皮素和血栓調(diào)節(jié)蛋白(P<0.01),高負壓組細胞分泌的血管舒縮物質(zhì)濃度比低負壓組高。
結(jié)論:模擬罐法負壓刺激體外絡(luò)脈,能夠促進
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