PGC-1α對VEGF-A啟動子調節(jié)研究.pdf

1、VEGF-A是PDGF/VEGF生長因子家族成員之一，是一種內皮細胞特異性的絲裂源。VEGF-A表現(xiàn)出多種功能，包括增加血管通透性、誘導內皮祖細胞等分化形成血管以及誘導已經存在的血管產生新的分支、促進內皮細胞遷移和抑制細胞凋亡等。PGC-1a是核受體家族的輔激活因子，可以和多種核受體相互作用直接或間接與靶基因的啟動子結合，從而激活靶基因的轉錄。研究發(fā)現(xiàn)，PGC-1a是調節(jié)細胞能量代謝的關鍵因子，冷暴露，營養(yǎng)缺乏，低氧等條件將誘導PGC-

2、1a的表達。此外，PGC-1a還參與糖脂代謝的調節(jié)。
　　 本課題組研究表明，在HepG2細胞和C2C12肌管細胞中PGC-1a能調節(jié)VEGF-A的表達。為了研究PGC-1a是否通過激活VEGF-A啟動子來上調VEGF-A的表達，我們構建了VEGF-A啟動子驅動的報告基因系統(tǒng)，用TK啟動子驅動的報告基因作為內參照，發(fā)現(xiàn)PGC-1a能激活VEGF-A啟動子活性3到4倍。為了進一步研究在調節(jié)VEGF-A啟動子過程中與PGC-1a相互

3、作用的核受體，我們分析了VEGF-A啟動子的核苷酸序列，發(fā)現(xiàn)有多種核受體的保守結合位點，因此我們采用了啟動子5'系列缺失的方法進行研究。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)PGC-1a與ERRa共轉染HepG2細胞可以激活VEGF-A啟動子活性5到6倍。進一步用表達PGC-1a的腺病毒感染HepG2細胞和C2C12肌管細胞，發(fā)現(xiàn)PGC-1a可以上調VEGF-AmRNA約4倍。培養(yǎng)的C2C12肌管細胞感染表達PGC-1a的腺病毒后，收集條件培養(yǎng)基并