PRMT1對(duì)高糖毒性介導(dǎo)的INS-1細(xì)胞功能的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討PRMT1的表達(dá)對(duì)高糖介導(dǎo)的胰島β細(xì)胞功能紊亂的影響及機(jī)制。
　　方法：用脂質(zhì)體向INS-1細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染siPRMT1和過(guò)表達(dá)FOXO1的質(zhì)粒。將未轉(zhuǎn)染細(xì)胞及轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞用含或不含AMI-1（100μM）的葡萄糖培養(yǎng)基（5.6mmol/L或25mmol/L葡萄糖）進(jìn)行培養(yǎng)。48h后，用蛋白印記法檢測(cè)PRMT1、FOXO1、PDX-1總蛋白,精氨酸甲基化蛋白（α-metR），PDX-1、FOXO1細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移改變。用放免法檢測(cè)

2、葡萄糖刺激的胰島素分泌（GSIS）情況，用Fura-2AM檢測(cè)INS-1細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度，ELISA檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)cAMP含量。
　　結(jié)果：①慢性高糖可以增加基礎(chǔ)胰島素分泌，損傷GSIS，減少細(xì)胞內(nèi)胰島素含量，增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度及cAMP含量，并伴隨PRMT1總蛋白和甲基化蛋白的增加和PDX-1蛋白的減少。②抑制PRMT1的活性或表達(dá)通過(guò)減少甲基化蛋白，改變PDX-1、FOXO1的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移，減少高糖狀態(tài)下細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度及cA

3、MP含量進(jìn)而增加細(xì)胞內(nèi)胰島素含量，改善GSIS。③過(guò)表達(dá)活性FOXO1沒(méi)有引起甲基化蛋白的改變，它通過(guò)基金項(xiàng)目：重慶市自然科學(xué)基金一般項(xiàng)目（編號(hào)：csct2011jjzt0100）增加細(xì)胞核內(nèi)FOXO1含量減少PDX-1向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度及cAMP含量，從而逆轉(zhuǎn)AMI-1介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)胰島素含量增加及GSIS改善。
　　結(jié)論：PRMT1是調(diào)節(jié)INS-1細(xì)胞功能的因素之一，其機(jī)制可能是增強(qiáng)的甲基化活性介導(dǎo)了FOXO