超聲造影劑介導PTEN基因影響卵巢癌的實驗研究.pdf

1、本實驗選用卵巢癌細胞株進行體外實驗，觀察超聲造影劑介導基因治療的可行性，研究超聲照射時間和超聲造影劑劑量對人野生型PTEN質粒導入人卵巢癌細胞效果的影響，目的是探討一種新型、高效的基因導入方法及PTEN基囚影響卵巢癌的實驗研究。實驗分為三部分：論文一探討了超聲造影劑促進細胞轉染的體外實驗模式的建立。論文二研究了超聲造影劑介導PTEN基因轉染人卵巢癌細胞及其相關特性。論文三探討了超聲造影劑介導PTEN基因轉染對人卵巢癌細胞體外粘附、遷移和

2、侵襲影響的研究。并對相應的作用機制進行了初步探討，試圖為進一步的超聲治療卵巢癌體內(nèi)試驗研究提供依據(jù)，并為卵巢癌治療提供新的思路。 目的：探討超聲介導造影劑微泡破裂法促進外源性基因定向轉移的實驗模式，以期為腫瘤的基因治療研究提供新思路。 結果在目的基因轉染過程中，轉染方法對靶細胞的安全性是實驗首先考慮的因素。通過不同實驗組以MTT法檢測不同超聲照射時間對細胞的殺傷作用，結果顯示：在超聲作用強度0.7W/cm<'2>，作用時間小

3、于60s，對靶細胞安全性較高，隨超聲照射時間延長，細胞存活率明顯下降。國外有關研究顯示，當超聲功率大于0.6W/cm<'2>時，目的基因在靶細胞才能有效表達。所以，本實驗設定超聲參數(shù)為：超聲波強度0.7W/cm<'2>，作用時間30s。當超聲強度為0.7W/cm<'2>，MI為1.0，作用時間30秒時，檢測體外培養(yǎng)細胞實驗組存活率是70.01％，通過組間對照細胞活性無明顯影響，隨著超聲照射時間的延長，細胞存活率明顯下降；造影劑濃度是10