四君子湯與5-FU合用誘導人胃癌細胞凋亡及其機理的實驗研究.pdf

1、目的：研究經(jīng)典復方四君子湯與5-FU合用誘導胃癌細胞凋亡的作用及其機理。 方法：采用中藥血清藥理學和體外細胞培養(yǎng)的實驗方法，用四君子湯的含藥血清和稀釋的5-FU溶液作用于人胃癌細胞(SGC-7901細胞株)后，通過倒置顯微鏡來觀察細胞形態(tài)改變，用MTT法測定腫瘤細胞生長抑制率，流式細胞儀檢測細胞周期分布和細胞的凋亡指數(shù)；并以免疫組化法來檢測兩藥合用對人胃癌細胞凋亡相關(guān)基因(p53、Bcl-2和Bax)表達的影響。同時，對四君子湯

2、含藥血清的主要成分進行檢測。 結(jié)果：四君子湯含藥血清與5-FU聯(lián)合應(yīng)用能抑制人胃癌細胞SGC-7901生長，10％的低劑量、中劑量和高劑量血清分別與5-FU合用組的24小時抑制率分別為35.49％、43.45％、50.36％，具有劑量依賴性。倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，經(jīng)兩藥共同作用后，胃癌細胞SGC-7901變小、變圓，懸浮于培養(yǎng)液中，胞漿透明度下降，胞膜完整，顆粒感、折光性增強，以高劑量合用組最為明顯。流式細胞儀PI單染色法檢測細胞

3、周期顯示，5-FU對SGC-7901細胞具有G1/S期阻滯作用；高劑量血清與5-FU合用具有明顯的S期阻滯作用，而其他組細胞周期分布較對照組而言變化不是很明顯。AV/PI雙染色法計數(shù)顯示低、中、高劑量血清與5-FU合用作用細胞8小時和24小時后，細胞凋亡指數(shù)分別與對照組比較有顯著性差異，且較兩種藥單獨使用時的作用顯著增強，且隨劑量的加大作用愈強。四君子湯含藥血清與5-FU合用作用于SGC-7901后能明顯下調(diào)Bcl-2的表達，上調(diào)Bax