羅格列酮對肝癌SMMC-7721細胞VEGF、AKT-,1-2-、P-AKT-,1-蛋白表達影響的研究.pdf

1、目的：肝細胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我國最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率高且難以治愈，病程進展迅速，易侵襲、轉移、復發(fā)率高。隨著醫(yī)療技術和醫(yī)學科學研究的發(fā)展，對肝細胞癌的診斷及治療技術已經(jīng)有了很大的提高。但是關于肝細胞癌發(fā)生發(fā)展的確切機制還不清楚，目前仍然沒有有效的預防措施，因此深入地研究肝細胞癌的發(fā)病機理以及探討新的預防及治療措施具有極其重要的臨床意義。 過氧化物酶體增殖物激活受體(Per

2、oxisome proliferator-activated receptors，PPARs)是甾體激素受體超家族的新成員，PPARs共有3個亞型即PPARα、PPARβ、PPARγ，它們在結構、功能及組織分布上均有差異。PPARs的生物學功能復雜，參與調節(jié)脂質代謝與糖代謝、脂肪細胞分化和能量平衡、炎癥反應、動脈粥樣硬化及腫瘤細胞的分化與凋亡等生理和病理過程。近年來的許多研究表明PPARγ在多種腫瘤細胞中均有表達，通過多種途徑抑制細胞增

3、殖、誘導細胞凋亡及分化、抑制血管生成和降低腫瘤侵襲能力等。 PPARγ的配體包括天然型配體和合成型配體兩類。前者由實驗證實從前列腺素D2衍生出的一系列前列腺素代謝產(chǎn)物是PPARγ的天然配體，其中15-脫氧前列腺J2(15d-PGJ2)與PPARγ的結合作用最強。合成型配體主要是胰島素增敏劑噻唑烷二酮類化合物(Thiazolidinediones，TZDs)，包括羅格列酮(Rosiglitazone，Rosi)、匹格列酮(piog

4、litazone)、曲格列酮(troglitazone)等，臨床上主要用于II型糖尿病的治療。 國外的一些實驗證明PPARγ激動劑可以有效地預防腫瘤的發(fā)生，有望在腫瘤的化學預防中發(fā)揮重要作用。羅格列酮是噻唑烷二酮類藥物中生物利用度最高藥效最強的一種藥物，且其毒副作用相對較小。我們以前的試驗結果表明羅格列酮可以顯著抑制肝癌SMMC-7721細胞的生長并且誘導凋亡。本試驗通過研究羅格列酮對肝癌細胞SMMC-7721中VEGF、AKT

5、1/2及P-AKT1表達的影響，探討PPARy抑制肝癌SMMC-7721細胞生長的可能作用機制。 方法：1 SMMC-7721細胞常規(guī)培養(yǎng)，取培養(yǎng)48小時的細胞加入羅格列酮分0.1、1、10、100μmol/L4個濃度組，以及選取加入10μmol/L藥物的細胞取24h、48h、72h三個作用時間，采用Western Blot法進行檢測，觀察羅格列酮的對SMMC-7721細胞中VEGF基因表達的影響來探討羅格列酮對肝細胞癌血管生成

6、影響的可能作用機制。 2.SMMC-7721細胞常規(guī)培養(yǎng)，取培養(yǎng)48小時的細胞加入羅格列酮分1、10、100μmol/L3個濃度組，以及選取加入10μmol/L，藥物的細胞取0.5h、1h、2h、6h四個作用時間，采用Western Blot法進行檢測，觀察羅格列酮對SMMC-7721細胞中AKT1/2、P-AKT1基因表達的影響來探討羅格列酮對肝細胞癌的抑制作用是否與P13K/AKT信號轉導通路有關。應用單因素方差分析統(tǒng)計光密

7、度研究有無量效及時效關系。 結果：1 羅格列酮可以顯著降低SMMC-7721細胞株中VEGF蛋白的表達，并呈顯著的時間依賴性和劑量依賴性變化(P<0.05)。 2.羅格列酮對SMMC-7721細胞株中AKT1/2、P-AKT1蛋白的表達無顯著影響，表現(xiàn)在PVDF膜上顯示條帶亮度及寬度無明顯變化(P>0.05)。 結論：1 羅格列酮可以顯著降低SMMC-7721細胞株中VEGF蛋白的表達，并且呈顯著的時間依賴性和劑