多種分子標記物在癌癥檢測中的研究.pdf

1、對于癌癥而言，早發(fā)現(xiàn)早治療，才能有效的提高生存率。研究發(fā)現(xiàn)在癌癥中一些物質(zhì)如基因、蛋白等會出現(xiàn)明顯的變化，它們作為腫瘤標記物在對腫瘤的篩選、診斷和判斷預后以及實現(xiàn)個體化治療中扮演著重要的角色。所以，發(fā)現(xiàn)新型的腫瘤標記物并建立準確的檢測方法對于癌癥的判斷來說都具有重要意義。
　　 第一章，本章首先介紹了25-羥基維生素D與腺癌的關(guān)系，在整合了25-羥基維生素D與腺癌之間的流行病學以及分子機制研究后創(chuàng)新性提出了25-羥基維生素D作為

2、預測腺癌發(fā)生風險的標記物的可能性，并通過建立的25-羥基維生素D檢測方法對129名不同類型的腺癌病人以及81名非腺癌對照組進行了臨床驗證(36.5±10.7 nmol/L vs81.4±19.8 nmol/L)，結(jié)果表明腺癌病人的25-羥基維生素D含量符合國際上維生素D缺失標準（50 nmol/L以下）。之后介紹了另一種腫瘤標記物融合基因在白血病診斷中的重要性，其中以慢性粒細胞白血病中的費城染色體為例，探析了其融合基因結(jié)構(gòu)以及所形成的融

3、合蛋白功能，總結(jié)了慢性粒細胞白血病的各種治療方式、分型診斷方法，匯總了目前融合基因的檢測方法，突顯融合基因檢測在臨床上的重要性。
　　 第二章，基于目前融合基因檢測方法的優(yōu)缺點，以慢性粒細胞白血病中BCR-ABL融合基因為切入點，利用多重RT-PCR技術(shù)，結(jié)合毛細管電泳檢測技術(shù)，建立相應的檢測方法。采用重疊延伸法構(gòu)建了BCR-ABL對應的陽性質(zhì)粒e1a2，e13a2和e14a2用以驗證引物的擴增效果，并可作為臨床陽性標準品。為了

4、滿足在一個PCR反應中就可以將三種融合形式都檢測出的要求，進行了所有引物的混合，通過PCR反應體系以及條件的優(yōu)化，建立了多重PCR檢測技術(shù)。并與毛細管電泳（CE）技術(shù)相結(jié)合，可快速、準確的檢測樣本。將構(gòu)建的方法在慢性粒細胞白血病樣本上進行了臨床驗證，結(jié)果均為陽性，與測序結(jié)果以及臨床分析結(jié)果一致。該方法方便快捷、價格低廉，并能清晰的判斷融合基因融合類型，可作為染色體核型分析的輔助手段，應用于白血病臨床初期的分型診斷，并有助于預后以及療效評