依達(dá)拉奉對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:研究依達(dá)拉奉對(duì)大鼠腦缺血再灌注引起的氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及對(duì)大腦海馬區(qū)細(xì)胞凋亡活性的影響。
　　方法:Wistar大鼠按體重隨機(jī)分為3組。(1)腦缺血再灌注組(I/R組):參照Longa大鼠大腦中動(dòng)脈內(nèi)栓線阻斷法(MCAO)適當(dāng)改良后進(jìn)行，建立大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型。(2)假手術(shù)組(sham組):與其他組造模方法相同但不拴線。(3)依達(dá)拉奉組（E組）:參照Longa的MCAO法適當(dāng)改良后進(jìn)行，建立大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型

2、。大鼠急性全腦缺血模型用MCAO法制備成功后，依達(dá)拉奉組于缺血后30min腹腔內(nèi)注射依達(dá)拉奉3mg/kg，30min后給予皮下注射相同劑量1次，以維持血液中較穩(wěn)定的藥物治療濃度。假手術(shù)組和腦缺血組同法給與等量生理鹽水。各組大鼠每天給藥一次，連續(xù)7天;斷頭處死后取腦組織，用2，3，5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色法測(cè)定腦梗死面積;另取按上述方法給藥后的大鼠，斷頭取腦，去除腦干與小腦，干燥稱重法計(jì)算腦組織含水量;應(yīng)用TdT介導(dǎo)的原位末端標(biāo)記

3、(TUNEL)法標(biāo)記斷裂的DNA片段檢測(cè)凋亡細(xì)胞;腦組織勻漿后，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作.測(cè)定丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及乳酸脫氫酶(LDH)活性;采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)大腦海馬區(qū)組織Caspase-3、Bcl-2、Bax表達(dá)的量。
　　結(jié)果:
　　1、與腦缺血再灌注組(I/R組)相比，依達(dá)拉奉（E組）可以顯著提高腦組織中SOD的活性(P＜0.05)。E組:15.86±2.41 vs I/R組;12.2

4、9±3.41，P＜0.05。
　　2、與腦缺血再灌注組（I/R組）相比，依達(dá)拉奉（E組）可以顯著降低腦組織中LDH的活性(P＜0.05)。E組:136.52±33.76 vs I/R組:196.03±43.20，P＜0.05。
　　3、與腦缺血再灌注組（I/R組）相比，依達(dá)拉奉（E組）可以降低MDA含量。(P＜0.05) E組:30.50±3.04 vs I/R組:36.41±5.43, P＜0.05。
　　4、與腦缺

5、血再灌注組（I/R組）相比，依達(dá)拉奉（E組）可以減少腦梗死體積(P＜0.05),E組:48.89±7.63 vs I/R組:72.23±6.53, P＜0.05。
　　5、依達(dá)拉奉對(duì)于Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞及Bax陽(yáng)性細(xì)胞的影響。
　　Bax: E組:10.50±3.21 vs I/R組:16.41±3.32，P＜0.05，依達(dá)拉奉能使Bax陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少。
　　Bcl-2; E組:24.37±3.74 vs I/R組:1

6、9.03±4.10,P＜0.05，依達(dá)拉奉能使Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加。
　　表明Bcl-2/Bax的表達(dá)比例增加(P＜0.05)。
　　6、與腦缺血再灌注組（I/R組）相比，依達(dá)拉奉（E組）可以降低Caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(P＜0.05)。E組:15.81±2.35 vs I/R組:22.29±3.31，P＜0.05。
　　結(jié)論:依達(dá)拉奉對(duì)大鼠腦缺血再灌注引起的氧化應(yīng)激損傷具有保護(hù)作用，保護(hù)機(jī)制可能與上調(diào)抑凋亡因