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文檔簡介
1、目的：探討在乳腺癌細胞中，去甲基化藥物5-氮雜脫氧胞苷對雌激素受體α(estrogen receptor alpha，ERα)基因，上皮性鈣粘連素(E-cadherin，E-cad)基因表達的影響，及其對細胞增殖和侵襲能力的影響，為乳腺癌的基因治療提供一定的指導意義。 方法：(1)使用去甲基化藥物5-氮雜脫氧胞苷處理MDA-MB-231細胞，利用細胞生長曲線、MTT法及流式細胞儀檢測5-氮雜脫氧胞苷對MDA-MB-231細胞增殖
2、和周期的影響；(2)通過RT-PCR和免疫組化檢測5.氮雜脫氧胞苷對ER Q陰性乳腺癌細胞MDA-MB-231 ER α、E-cad及基質金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表達的影響；(3)通過Boyden小室侵襲實驗檢測5-氮雜脫氧胞苷對乳腺癌細胞浸潤能力的影響；(4)用限制性酶PCR檢測5-氮雜脫氧胞苷作用前后的乳腺癌細胞中ERα基因啟動子及第一外顯子區(qū)域的甲基化情況。 結果：
3、(1)5-氮雜脫氧胞苷能使MDA-MB-23 1細胞的生長速度明顯減慢，細胞周期被阻滯在G0/G1期；(2)5-氮雜脫氧胞苷部分恢復ER α陰性乳腺癌MDA-MB-231細胞ERα及E-cad基因的表達；(3)5-氮雜脫氧胞苷使MDA-MB-231細胞中MMP-2基因表達下降，及該細胞的侵襲能力降低；(4)MDA-MB-231細胞ERα基因中檢測到HpaⅡ甲基化位點，5-氮雜脫氧胞苷作用后未檢測到甲基化位點。結論：(1)5-氮雜脫氧胞苷
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