脊柱側(cè)凸模型椎體骨超微結(jié)構(gòu)及藥物干預(yù)可能機(jī)制的研究.pdf

1、目的:
　　通過(guò)不對(duì)稱力拴系在雙足鼠中誘發(fā)脊柱側(cè)凸動(dòng)物模型，比較各組動(dòng)物模型的異同，分析其發(fā)生原因、機(jī)理，探討藥物對(duì)大鼠脊柱側(cè)凸模型椎體骨超微結(jié)構(gòu)影響及可能作用機(jī)制。為進(jìn)一步研究IS病因?qū)W及防治奠定一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　本實(shí)驗(yàn)采用Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為3三組。雙足鼠組20只;拴系-雙足鼠組20只;重組甲狀旁腺激素(PTH)干預(yù)組20只，術(shù)后第二天每天皮下注射PTH

2、。先后四次行SD大鼠脊柱平片及骨密度檢查，觀察Cobb角、骨密度的改變。術(shù)后12周麻醉處死大鼠，取T11、T12及T11～T12椎間盤(pán)組織，甲醛固定、脫鈣、脫水、石蠟包埋作HE染色、TUNEL染色，觀察組織學(xué)改變。取L170％乙醇固定，作MicroCT掃描，觀察骨微結(jié)構(gòu)變化。處死SD大鼠時(shí)取血作骨轉(zhuǎn)化指標(biāo)檢測(cè)，了解骨代謝情況。
　　結(jié)果:
　?、俅笫笠话銧顩r:三組大鼠隨著周齡的變化，三組大鼠的體重呈逐漸增加趨勢(shì)，在術(shù)后第4、

3、8、12周時(shí)各組體重有顯著差異(P＜0.05);三組組間體重增長(zhǎng)曲線走向基本一致，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　?、贑obb角變化:雙足鼠組無(wú)脊柱側(cè)凸的發(fā)生，拴系-雙足鼠組、PTH干預(yù)組大鼠均發(fā)生了側(cè)凸。從第4周開(kāi)始注射PTH，術(shù)后第8周、12周時(shí)，PTH干預(yù)組Cobb角、頂椎旋轉(zhuǎn)角小于拴系-雙足鼠組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　③大鼠DXA檢查:雙足鼠組和拴系-雙足鼠組大鼠不同時(shí)期，兩組大鼠各個(gè)部位的骨密度(BMD)、骨礦含量

4、(BMC)、骨骼面積(AREA)在不斷增加。同時(shí)期兩組大鼠的全身和脊柱的BMD、BMC、AREA之間無(wú)明顯差異。PTH干預(yù)組從第4周注射了PTH之后，BMD與BMC都有迅速的增加（尤其脊柱和全身），較其他兩組出現(xiàn)了顯著性差異(P＜0.05)。
　　④骨微結(jié)構(gòu)變化:雙足鼠組的凸側(cè)與凹側(cè)比較BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N、Tb.Sp均沒(méi)有顯著的變化(P＞0.05)。拴系-雙足鼠組的凸側(cè)與凹側(cè)的BMD、BV/TV、Tb.Th、

5、Tb.Sp存在顯著性差異(P＜0.05)。PTH干預(yù)組較其他兩組BMD增高，Tb.Th增厚，BV/TV增加，Tb.Sp變小。
　　⑤組織病理學(xué)改變:HE染色拴系-雙足鼠組、PHT干預(yù)組頂椎椎體、椎間盤(pán)存在楔形變，髓核組織偏向凸側(cè)，凹側(cè)軟骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少，體積相對(duì)正常細(xì)胞小;凸側(cè)生長(zhǎng)板軟骨細(xì)胞增殖活躍，細(xì)胞較多。TUNEL染色拴系-雙足鼠組、PHT干預(yù)組凹側(cè)生長(zhǎng)板軟骨細(xì)胞的凋亡指數(shù)較凸側(cè)明顯增加并高于雙足鼠組。
　?、薰寝D(zhuǎn)化

6、指標(biāo)檢測(cè):PTH干預(yù)組與雙足鼠組、拴系-雙足鼠在血清特異性堿性磷酸酶(ALP-B)、骨鈣素、血清Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)比較均明顯升高，有顯著差異性(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.后路不對(duì)稱力拴系在雙足鼠中可以建立脊柱側(cè)凸的動(dòng)物模型。
　　2.不對(duì)稱力拴系、PTH對(duì)大鼠生長(zhǎng)過(guò)程中的體重?zé)o影響。
　　3.脊柱側(cè)凸動(dòng)物模型頂椎凹側(cè)、凸側(cè)相比較:凹側(cè)凋亡細(xì)胞明顯增加。該模型細(xì)胞凋亡可能與不對(duì)稱力拴系誘發(fā)“惡