侵襲性垂體腺瘤相關蛋白質(zhì)的表達及標志性分子的初步探討.pdf

1、本文分兩部分論述了侵襲性垂體腺瘤相關蛋白質(zhì)的表達及標志性分子。 第一部分侵襲性垂體腺瘤相關蛋白質(zhì)的表達。 目的：利用蛋白指紋圖譜技術分離和識別侵襲性垂體腺瘤組織差異蛋白的表達，以其找到有利于侵襲性垂體腺瘤早期診斷、預后監(jiān)測的標志物或標志物群。 方法：25例垂體腺瘤組織標本取自經(jīng)蝶或開顱手術，利用蛋白指紋圖譜技術與激光解析離子化飛行時間質(zhì)譜技術在腫瘤組織原位上分離識別侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤細胞的胞膜、胞漿和胞核的

2、差異蛋白，分析其在原位組織中的表達水平，探討其與垂體腺瘤侵襲性相關的程度，為更好地研究垂體腺瘤侵襲生物行為提供實驗依據(jù)。 結(jié)果：通過蛋白指紋圖譜技術研究在侵襲性與非侵襲性垂體腺瘤組織中表達分子量在25,000以下的差異蛋白水平可以看出：差異蛋白質(zhì)峰共有75個，蛋白質(zhì)表達含量與侵襲性呈正相關的峰值有42個，呈負相關的峰值有33個。其中目前已查到的分子有13個，而尚未明確的差異蛋白仍有62個。在對垂體瘤及瘤周組織的分析中，我們發(fā)現(xiàn)1

3、6個差異蛋白的峰值，其中3個蛋白為我們所了解，仍有13個蛋白為我們所不知。 結(jié)論：垂體腺瘤的侵襲既有內(nèi)在微環(huán)境的作用，也有外在環(huán)境的作用。其過程是源于腫瘤細胞及周圍組織表達蛋白質(zhì)的程度不同。從本實驗結(jié)論中可以看出侵襲性垂體腺瘤比非侵襲性垂體腺瘤表達含量有差異的蛋白峰值有75個。如癌基因產(chǎn)生的蛋白質(zhì)Ras、nm23，凋亡因子Bcl2 β，趨化因子IL-8、CXCL12，生長因子TGF β及其受體等。此外，也觀察到來自下丘腦釋放的G

4、RF、GnRH和Ghrelin，也有垂體本身產(chǎn)生的S-100、Leptin等。說明垂體腺瘤產(chǎn)生侵襲性是一個多環(huán)節(jié)(Multiple Hit)的過程，是許多分子參與、誘導而成的整體效應，而非單一因素或個別途徑誘發(fā)形成。 第二部分CD44v6、CXCL12、CXCR4、Ki-67、Galectin-3及 CD105在人垂體腺瘤中聯(lián)合表達的水平 目的：研究垂體腺瘤侵襲與侵襲相關因子表達的關系：粘附因子 CD44v6、趨化因子C

5、XCL12及其受體CXCR4、增殖細胞相關核抗原 Ki67、Galectin-3及CD105在人侵襲性垂體腺瘤及非侵襲性垂體腺瘤中聯(lián)合表達的水平及臨床意義。 方法：19例垂體腺瘤組織標本取自經(jīng)蝶或開顱手術，利用差異蛋白和相對應的單克隆抗體，富集侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤組織及外周血循環(huán)白細胞。再利用免疫熒光和免疫組化技術研究差異蛋白在侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤上的表達分布，同時利用流式細胞儀檢測差異蛋白在侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤及外

6、周血循環(huán)白細胞在手術前后的表達差異。從而將創(chuàng)新的方法與傳統(tǒng)的MRI技術、HE染色技術、激素水平測定及免疫組化技術應用侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤的研究，以便為侵襲性垂體腺瘤的體外研究提供依據(jù)。 結(jié)果：侵襲組(20.51±7.98)與非侵襲組(7.52±2.6)間CD44v6的表達水平存在顯著性差異(P<0.05)；而Ki-67、Galectin-3、CXCL12、CXCR4及CD105在兩組間不存在顯著性差異(P>0.05)。在侵襲

7、組內(nèi)部，Ki-67的表達水平在侵襲海綿竇組(7.3±2.0)與侵襲鞍底組(16.8±4.2)之間存在顯著性差異(P<0.05)。而CD105在侵襲海綿竇組(14.7±3.8)的表達高于侵襲鞍底組(5.25±2.2)(P<0.05)。CXCR4在侵襲海綿竇組(3.8±1.4)的表達水平低于侵襲鞍底組(6.75±1.0)(P<0.05)。 結(jié)論：可以初步推斷CD44v6與垂體腺瘤的侵襲性存在密切關系?？赡茏鳛榇贵w腺瘤侵襲性的標記物之