樹(shù)突狀細(xì)胞在鼻息肉組織中的分布特點(diǎn)及其意義研究.pdf

1、1.背景與目的:
　　樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)是人體最強(qiáng)的專職抗原遞呈細(xì)胞(Antigen present cell,APC),它的特點(diǎn)是能夠刺激初始型T細(xì)胞(Na?ve T cell)增殖,是機(jī)體免疫應(yīng)答的始動(dòng)者,也是調(diào)節(jié)T細(xì)胞分化方向的主要APC。另外,當(dāng)成熟DC缺乏時(shí),非成熟DC與T細(xì)胞之間的短暫、持續(xù)、不穩(wěn)定的作用即產(chǎn)生T細(xì)胞的免疫陰性選擇,產(chǎn)生了免疫耐受(2)。既能誘導(dǎo)免疫應(yīng)答又能誘導(dǎo)免疫耐受的D

2、C在炎癥性及變應(yīng)性疾病的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要的作用,已成為研究的熱點(diǎn)。
　　鼻息肉是耳鼻咽喉頭頸外科最常見(jiàn)的疾病之一,其發(fā)病機(jī)制至今尚未明確,但目前學(xué)者多傾向于炎癥性及變態(tài)反應(yīng)性等多因素病因。有學(xué)者將鼻息肉分為炎癥性息肉和變應(yīng)性息肉,前者以淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為主;后者以淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為主。而其中嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)是鼻息肉最具特征的病理變化,這種變化是由于多種細(xì)胞因子的作用所導(dǎo)致的,其中

3、IL-5是引起嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)的主要細(xì)胞因子。而在鼻息肉疾病初始階段,IL-5的主要來(lái)源是Th2細(xì)胞。鼻息肉組織中有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),且存在 Th1/Th2比例失衡,Th2細(xì)胞因子的表達(dá)具普遍的優(yōu)勢(shì)。但是,鼻息肉組織中存在的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和炎癥介質(zhì)已經(jīng)是處于炎癥反應(yīng)中、高級(jí)階段的病理現(xiàn)象,我們對(duì)鼻息肉炎癥免疫反應(yīng)初級(jí)階段的病理現(xiàn)象還缺乏認(rèn)識(shí)。
　　1993年,日本學(xué)者Yoshimi發(fā)現(xiàn)鼻腔正常黏膜中存在少量朗格罕細(xì)胞(Langerhan

4、s cell,絕大部分為DC),而鼻炎患者的鼻腔黏膜中朗格罕細(xì)胞的數(shù)量明顯增多。這一發(fā)現(xiàn)說(shuō)明以DC為主的朗格罕細(xì)胞參與了鼻腔炎癥性疾病的發(fā)生與發(fā)展。
　　因此,我們?cè)O(shè)想 DC在鼻息肉的發(fā)病過(guò)程中有可能扮演重要角色。目前,國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)到對(duì)這一設(shè)想的研究報(bào)道。本研究采用免疫組織化學(xué)、免疫熒光雙標(biāo)記及低照度熒光顯微鏡圖像分析檢測(cè)方法,觀察 DC在鼻息肉組織中的分布特點(diǎn),分析其意義,探討其在鼻息肉發(fā)病中的作用及其可能的作用機(jī)制,為深入研究

5、 DC在鼻息肉發(fā)病中的作用提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。并通過(guò)分組對(duì)照研究,探討激素治療對(duì)鼻息肉組織中 DC的影響。如果這一設(shè)想得到實(shí)驗(yàn)證實(shí),就有可能發(fā)展從鼻息肉發(fā)病的初級(jí)階段研究鼻息肉發(fā)病機(jī)制的新思路,加深和豐富我們對(duì)鼻息肉發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí),為鼻息肉的治療提供新的靶點(diǎn)。
　　2.方法:
　　選取符合納入標(biāo)準(zhǔn)的汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科2006年10月~2007年9月住院鼻息肉患者45例作為實(shí)驗(yàn)組,采集手術(shù)切除標(biāo)本45份;選取

6、同時(shí)行下鼻甲部分切除術(shù)的鼻中隔矯正術(shù)住院患者10例作為對(duì)照組,采集下鼻甲黏膜組織標(biāo)本10份。并將試驗(yàn)組根據(jù)術(shù)前有無(wú)激素治療情況將其分為兩組,即激素組24例和無(wú)激素組21例。所有標(biāo)本按要求處理后進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn)。
　?、庞妹庖呓M化法檢測(cè)其組織中S-100的表達(dá)情況。
　　⑵用免疫熒光雙標(biāo)記及低照度熒光顯微鏡圖像分析檢測(cè)方法檢測(cè)組織中CD1a/CD40同時(shí)表達(dá)的情況。
　　3.結(jié)果:
　?、疟窍⑷饨M中S-100表達(dá)高于下

7、鼻甲組,差別有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　⑵鼻息肉組中CD1a、CD40雙染陽(yáng)性細(xì)胞即DC分布面積、數(shù)量及密度與下鼻甲組比較,差別有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。
　　⑶DC主要分布在鼻息肉組織的黏膜下層,靠近上皮的位置DC的數(shù)目相對(duì)密集,以黏膜下固有層中浸潤(rùn)最多,有著由外向內(nèi)遞減的趨勢(shì),DC的大小及形態(tài)不一,鼻息肉假?gòu)?fù)層柱狀纖毛上皮中未見(jiàn)DC分布。另外,也有少量DC分布在腺體周?chē)?。其他部位僅見(jiàn)極少量DC。

8、>　?、燃に亟M、無(wú)激素組分別與正常組比較,DC總面積、DC總數(shù)及DC細(xì)胞密度,其P﹤0.01,具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。激素組與無(wú)激素組之間DC總面積、DC總數(shù)及DC密度,其P﹤0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.結(jié)論:
　?、疟窍⑷饨M織中 S-100及 CD1a陽(yáng)性細(xì)胞明顯較正常下鼻甲黏膜增多,說(shuō)明鼻息肉組織中DC數(shù)量明顯增多,DC在鼻息肉的發(fā)病中一定發(fā)揮了關(guān)鍵的或者核心的作用。
　?、艭D40陽(yáng)性說(shuō)明DC已具備了與T淋

9、巴細(xì)胞相互作用的能力,處于可與T淋巴細(xì)胞相互作用的階段。DC與T淋巴細(xì)胞的相互作用可能是促使鼻息肉組織中Th1/Th2比例失衡,Th2細(xì)胞因子的表達(dá)具普遍優(yōu)勢(shì)的重要因素。而Th2分泌的IL-5等的表達(dá)水平上調(diào)又促使嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)鼻息肉組織。
　?、翘瞧べ|(zhì)激素能顯著降低鼻息肉組織中DC的數(shù)量。糖皮質(zhì)激素可抑制DC的遷移聚集,抑制抗原遞呈,抑制T細(xì)胞的活化,從而抑制炎癥及變應(yīng)性反應(yīng)。
　?、菵C主要分布在黏膜下固有層,有從外向