羥基紅花黃色素A對(duì)永久性腦缺血大鼠炎癥反應(yīng)通路相關(guān)因子調(diào)控機(jī)制初探.pdf

1、羥基紅花黃色素A(hydroxysafflor yellow A，HSYA)是紅花中的單體有效成分，近年來(lái)，對(duì)HSYA各方面藥理活性進(jìn)行了廣泛研究，特別是抗腦缺血方面，HSYA顯示了有效的抗腦缺血活性，其中涉及的機(jī)制包括抗血小板聚集，抗氧化自由基損傷，抗興奮性氨基酸毒性等等，然而對(duì)其抗腦缺血后炎癥的研究目前較少。 前期，我們的基因芯片結(jié)果提示HSYA可能發(fā)揮調(diào)節(jié)炎癥因子轉(zhuǎn)錄表達(dá)的作用，為了進(jìn)一步深入闡明HSYA抗腦缺血的機(jī)制，本

2、研究采用線栓法制備大鼠永久性腦缺血模型，首先比較不同HSYA給藥方式，并最終選取以HSYA靜脈注射半衰期為間隔連續(xù)多次給藥這一最佳方案，觀察HSYA對(duì)永久性腦缺血大鼠炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑核轉(zhuǎn)錄因子kB調(diào)節(jié)通路相關(guān)因子的作用。 于缺血后3h，6h，12h，24h取大腦皮層：Western blotting檢測(cè)細(xì)胞核及胞漿核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65及胞漿磷酸化IκB-α(pIκB-α)蛋白水平表達(dá)；Trans AM試劑盒檢測(cè)NF-κB

3、 DNA結(jié)合活性；RT-PCR檢測(cè)炎性因子TNF-α，IL-1β，IL-6，IL-10轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)。ELISA檢測(cè)上述炎性因子的蛋白水平表達(dá)。同時(shí)，還將HSYA的作用強(qiáng)度與NF-xB抑制劑--二硫代氨基甲酸吡咯烷銨(Pyrrolidine dithiocarbamate ammonium salt，PDTC)做比較。最后，HPLC法進(jìn)行了HSYA在缺血大鼠腦組織及血漿中的含量測(cè)定，并以核磁共振為研究手段進(jìn)行了初步的HSYA抗腦缺血皮層腦

4、組織的代謝組學(xué)研究。結(jié)果表明，大鼠腦缺血后連續(xù)多次靜脈注射HSYA(10mg·kg-1)，能夠顯著抑制NF-κB通路p65核轉(zhuǎn)位以及IκB-α的磷酸化，降低NF-κB DNA結(jié)合活性，并降低促炎性因子TNF-α，IL-1β，IL-6 mRNA及蛋白水平的表達(dá)，升高抗炎因子IL-10 mRNA及蛋白表達(dá)水平，能夠抑制缺血后腦組織毒性代謝產(chǎn)物乳酸及谷氨酸的含量，升高GABA及葡萄糖，提示HSYA的抗腦缺血作用可能與其抑制炎癥信號(hào)途徑中NF-