COP1在肝硬化及合并肝癌過(guò)程中表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過(guò)研究COP1在肝硬化及肝癌中的表達(dá)，說(shuō)明COP1在肝硬化及肝癌中的表達(dá)水平變化的規(guī)律;探討COP1表達(dá)水平在肝硬化發(fā)展及合并肝癌形成進(jìn)程中的變化規(guī)律及臨床意義。
　　方法:90只SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按隨機(jī)化原則分為2組，對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組。在給藥前分別于對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)選取5只予以處死，實(shí)驗(yàn)組應(yīng)用二乙基亞硝胺和微囊藻毒素建立大鼠肝癌模型:每5天腹腔注射0.25％DEN溶液(10mg/kg)+藻毒素MC-LR(20ug

2、/kg)1次，連續(xù)16周，給藥4周為肝細(xì)胞損傷期，8周至12周時(shí)為肝細(xì)胞增生-硬化期，16周時(shí)為肝細(xì)胞癌變期。對(duì)照組每5天腹腔注射等量生理鹽水1次。每次注藥前對(duì)大鼠的體重進(jìn)行測(cè)量，注射劑量根據(jù)體重變化及一股狀況進(jìn)行調(diào)整，如有異常及時(shí)停用或暫緩給予DEN，以減少死亡率。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料，整個(gè)實(shí)驗(yàn)共持續(xù)17周。于實(shí)驗(yàn)后第4周、8周、12周分別于對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)選取10只處死，并于16周處死對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組剩余大鼠。（可視實(shí)驗(yàn)中

3、動(dòng)物死亡情況稍作調(diào)整）。
　　結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟標(biāo)本石蠟切片HE染色顯示:肝細(xì)胞損傷期、肝細(xì)胞增生-硬化期、肝細(xì)胞癌變期。
　　2.PCR檢測(cè)顯示COP1表達(dá)先逐漸降低后急驟升高，COP1的表達(dá)在肝細(xì)胞損傷期中有差異性，p＜0.05。在肝細(xì)胞增生-硬化期無(wú)顯著差異，p＞0.05，在肝細(xì)胞癌變期有明顯差異性，p＜0.05。在肝細(xì)胞損傷各期COP1表達(dá)量均低于對(duì)照組且差異性明顯，p＜0.05;肝細(xì)胞癌形成時(shí)COP1表達(dá)明顯

4、高于對(duì)照組，p＜0.05。
　　3.免疫組化結(jié)果示:p53在肝臟損傷過(guò)程中處于高表達(dá)狀態(tài)，肝細(xì)胞損傷期p53表達(dá)呈上升趨勢(shì)，并有明顯差異性p＜0.05，肝硬化期p53表達(dá)較肝纖維形成期稍有下降，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義p＞0.05，肝癌形成期p53表達(dá)上調(diào)，與肝硬化形成期相比差異明顯p＜0.05。實(shí)驗(yàn)組各期p53表達(dá)均高于對(duì)照組且差異性顯著，p＜0.05。
　　結(jié)論:1.COP1依據(jù)肝臟病理變化其表達(dá)也隨之改變。
　　2.在肝硬