猴頭菌多糖提取、脫色工藝及生物活性的研究.pdf

1、多糖是猴頭菌中的主要活性物質，目前，市場上銷售的猴頭菌制品大部分只進行了簡單加工，存在大量雜質，即便是猴頭菌多糖制品，也多為未經(jīng)優(yōu)化的粗多糖，含有較多蛋白質、色素，影響色澤的同時也不利于多糖最佳功效的發(fā)揮。所以找到適用于工業(yè)生產的粗多糖制備工藝及如何得到生物活性好的多糖至關重要。本論文對猴頭菌粗多糖的水提醇沉制備工藝各參數(shù)進行了優(yōu)化，對猴頭菌多糖的脫色方法進行了詳細研究，并比較了脫色前后猴頭菌多糖的理化性質及生物活性，為猴頭菌多糖的深度

2、開發(fā)利用奠定了理論基礎。論文的主要內容如下:
　　 1、采用單因素實驗詳細考察了水提醇沉中影響猴頭菌多糖得率及含量的各個因素，并對幾種多糖的干燥方式進行了比較，篩選出適合猴頭菌多糖的干燥方式;選取對猴頭菌多糖得率及含量有較大影響的因素通過正交實驗得到優(yōu)化的提取醇沉工藝為熱水提取兩次，乙醇終濃度為70％，液料比15∶1，濃縮比3∶1。通過各種酶法提取與對照的比較，對酶法提取方法進行了探索，發(fā)現(xiàn)大部分單一酶并不能提高多糖的得率及含量

3、。
　　 2、以脫色率，多糖保留率及體外免疫活性為指標，對三種常用的脫色方法進行比較，得出大孔樹脂更適合用于猴頭多糖的脫色。從十種不同類型的大孔樹脂中篩選出大孔弱堿性陰離子樹脂D315最適合于猴頭菌粗多糖的脫色。以脫色率，多糖保留率為評價指標，通過考察影響猴頭菌粗多糖脫色的各個因素，在單因素試驗基礎上，運用Box-Behnken試驗設計原理，采用三因素三水平的響應面分析法，建立了脫色率及多糖保留率與樹脂體積(mL)、脫色時間(h

4、)、樣品濃度(mg/mL)之間的二次回歸模型，在響應曲面圖和等高線圖的分析基礎上，對回歸模型進行數(shù)學分析得到優(yōu)化的靜態(tài)脫色工藝為:100mL加入樹脂37.12mL，脫色時間6小時，粗多糖濃度為13.85 mg/mL，脫色率(％)及多糖保留率(％)的理論值分別為70.59％和81.12％。在靜態(tài)脫色的基礎上，對動態(tài)脫色的工藝進行了研究，得到優(yōu)化的動態(tài)脫色工藝:流速為0.6BV/h，上樣量270mL，大孔樹脂D315在進行簡單預處理后，可重

5、復使用八次以上。
　　 3、對猴頭菌多糖脫色前后的理化性質（多糖含量、蛋白含量、分子量分布、單糖組成、特征基團）、體外免疫活性及對大鼠胃黏膜損傷修復作用進行了比較研究。研究表明，猴頭菌多糖脫色后，多糖含量有小幅度提高，蛋白含量下降明顯，單糖組成種類不變，巖藻糖所占比例略有下降，半乳糖及葡萄糖比例略有上升，C=O基團的振動減弱。粗多糖中含有β構型多糖，脫色過程可能使β構型多糖富集。
　　 猴頭菌多糖體外免疫活性在脫色后得到