ROP9與ABI2互作在ABA信號(hào)通路中的功能分析.pdf_第1頁(yè)
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1、分類號(hào)學(xué)校代碼10542密級(jí)學(xué)號(hào)2Q!!Q21壘l遜ROP9與ABl2互作在ABA信號(hào)通路中的功能分析ThefunctionanalysisoftheinteractionbetweenROP9andABl2inABAsignalingpathwav1一一一—，指導(dǎo)教師姓名、職稱鑾盤(pán)塾援奎盔屋熬援湖南師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)辦公室二零一四年五月對(duì)ROP9的T-DNA插入突變體salk111788的植株進(jìn)行了鑒定，并獲得了純合的突變植株。但

2、通過(guò)半定量分析發(fā)現(xiàn)其中ROP9的表達(dá)水平并未降低，反而與野生型相比有所升高，因此說(shuō)明其不是有效的ROP9的T-DNA插入突變體。還利用擬南芥轉(zhuǎn)基因技術(shù)將ROP9-pEGAD導(dǎo)入植株中，獲得了ROP9的過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株，并利用半定量分析確定了ROP9過(guò)表達(dá)植株中ROP9表達(dá)水平發(fā)生了上調(diào)。將ROP9的RNAi轉(zhuǎn)基因植株與過(guò)表達(dá)植株，種植于含有ABA的MS上，觀察其萌發(fā)率及生長(zhǎng)狀態(tài)。發(fā)現(xiàn)在ABA的處理下，ROP9的RNAi轉(zhuǎn)基因植株的萌發(fā)率

3、要明顯低于野生型，而過(guò)表達(dá)植株的萌發(fā)率要高于野生型；而未處理下，ROP9RNAi轉(zhuǎn)基因植株與過(guò)表達(dá)植株的萌發(fā)率與野生型沒(méi)有明顯的差別。同時(shí)通過(guò)原核表達(dá)出ROP9、CAROP9、DNROP9與ABl2蛋白，并進(jìn)行純化。將這些蛋白與ABl2一起孵育，然后進(jìn)行磷酸酶活性的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)正常態(tài)的ROP9與激活的CAROP9對(duì)ABl2的磷酸酶活性具有顯著的激活作用。綜合上述結(jié)果，說(shuō)明ROP9通過(guò)激活A(yù)Bl2的磷酸酶活性與ABl2相互作用，并在ABA信

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