基于膠體金和量子點(diǎn)免疫層析技術(shù)的研究及應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、免疫層析技術(shù)因其簡單快速、低成本、適合現(xiàn)場快速篩選,已成為食品安全中的重要檢測手段。本文制備了膠體金和量子點(diǎn)兩種探針作為標(biāo)記物,偶聯(lián)抗體,分別研制了呋喃它酮代謝物5-嗎啉甲基-3-氨基-2-惡唑烷酮(AMOZ)膠體金免疫層析試劑條、三聚氰胺膠體金免疫層析試劑條、三聚氰胺量子點(diǎn)免疫層析試劑條,并對試劑條性能進(jìn)行了研究。主要內(nèi)容有以下幾個(gè)部分:
  1.制備直徑18nm左右的膠體金顆粒,將其作為標(biāo)記探針,偶聯(lián)AMOZ單克隆抗體。分別將

2、包被抗原和兔抗鼠IgG在硝酸纖維素膜(NC)上劃線作為檢測線(T線)和質(zhì)控線(C線),制成免疫層析試劑條。AMOZ免疫層析試劑條的檢測限為10ng/mL,10min左右顯示結(jié)果。對飼料、肉類樣品進(jìn)行加標(biāo),分別用膠體金免疫層析試劑條與酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)檢測,結(jié)果一致。
  2.將膠體金作為探針標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體,采用類似方法制備出三聚氰胺免疫層析試劑條,試劑條的檢測限為10ng/mL,10min左右顯示結(jié)果,試劑條

3、密封放置在4℃150天后取出檢測,檢測效果無明顯改變。對牛奶等樣品進(jìn)行加標(biāo),分別用膠體金免疫層析試劑條與ELISA檢測,結(jié)果吻合。
  3.將巰基丙酸(MPA)作為穩(wěn)定劑,制備水溶性CdTe量子點(diǎn)(QDs)。對其進(jìn)行包殼,得到核殼結(jié)構(gòu)的CdTe/ZnS QDs。將此QDs純化后,與三聚氰胺抗體偶聯(lián),制備了量子點(diǎn)-抗體(QDs-Ab)復(fù)合物,優(yōu)化復(fù)合物條件,制備量子點(diǎn)免疫層析試劑條,試劑條檢測限與三聚氰胺膠體金免疫層析試劑條結(jié)果一致

4、,與10種物質(zhì)進(jìn)行交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn),特異性良好。對牛奶等樣品進(jìn)行加標(biāo)處理,用量子點(diǎn)免疫層析試劑條和ELISA檢測對比,兩者結(jié)果基本一致,相關(guān)性很好。
  免疫層析技術(shù)因其簡單、方便、快速、可在線檢測樣品,成為一種有效的檢測手段。本論文中,一方面,我們制備了膠體金納米顆粒并建立了檢測食品和飼料中AMOZ和三聚氰胺的免疫層析分析法,檢測的靈敏度較高;另一方面,我們成功制備CdTe/ZnS量子點(diǎn)并將其與三聚氰胺抗體交聯(lián),建立了高靈敏檢測三聚

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