FGF21與THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞中ABCA1和ABCG1的表達(dá)及其功能的影響.pdf

1、目的：
　　本實(shí)驗(yàn)以人THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞為對(duì)象，研究在成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21)作用下，細(xì)胞內(nèi)三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1和G1(ATP binding cassette transporter A1/G1，ABCA1/G1)的表達(dá)變化，以及細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出的變化，并研究其上游調(diào)控因子LXRα在此過程中所扮演的角色。從而探討FGF21在抗動(dòng)脈粥樣硬化過程中的可能作用和機(jī)制。
　　方法：
　　1.TH

2、P-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞經(jīng)不同濃度的FGF21(10、50、100ng/ml)處理后，提取各組細(xì)胞總RNA和蛋白質(zhì);
　　2.RT-qPCR檢測(cè)各組細(xì)胞ABCA1、ABCG1和LXRα的mRNA水平;
　　3.Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞ABCA1、ABCG1和LXRα的蛋白水平;
　　4.閃爍計(jì)數(shù)法檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出率;
　　5.siRNA方法沉默LXRα后，給予100ng/ml的FGF21處理

3、泡沫細(xì)胞。同上述方法，檢測(cè)各組細(xì)胞ABCA1和ABCG1的mRNA和蛋白表達(dá)的變化，以及細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出率的變化。
　　結(jié)果：
　　1.RT-qPCR顯示，不同濃度FGF21處理組ABCA1、ABCG1和LXRα的mRNA水平較對(duì)照組增高，且此作用隨著FGF21濃度的增加而逐漸增強(qiáng);
　　2.Western blot顯示，不同濃度FGF21處理組ABCA1、ABCG1和LXRα的蛋白水平較對(duì)照組增高，且此作用隨著FGF

4、21濃度的增加而逐漸增強(qiáng);
　　3.閃爍計(jì)數(shù)法顯示，不同濃度FGF21處理組細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出率較對(duì)照組增加，且此作用隨著FGF21濃度的增加而逐漸增強(qiáng)(P＜0.05);
　　4.LXRα-siRNA方法能夠減弱FGF21上調(diào)ABCA1和ABCG1表達(dá)的作用，也減弱FGF21促進(jìn)膽固醇流出的作用。
　　結(jié)論：
　　FGF21通過LXRα途徑，上調(diào)THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞中ABCA1和ABCG1的表達(dá)，從而促進(jìn)