廣西都安釀葡萄皮渣中化學成分的分離、活性分析及白藜蘆醇的提純工世研究.pdf

1、葡萄屬于落葉藤本植物，是地球上最古老的植物之一，也是人類最早栽培的果樹之一。我國種植葡萄的歷史悠久，而對于將葡萄釀酒飲用，李時珍在《本草綱目》中早有記載。廣西的野生毛葡萄是在喀斯特特殊的地理條件下自然生長的，資源豐富，研究價值顯著?，F(xiàn)代釀酒工藝中，往往將葡萄的皮渣除去，沒有充分利用其中的有效化學成分。本論文對廣西都安釀酒葡萄皮渣中的有效化學成分進行分析，并對其中的白藜蘆醇的提純工藝進行研究。主要分為以下幾個方面：
　　一、本文對9

2、5%乙醇浸泡過后的提取物分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取，收集各部分所得浸膏，按極性從小到大分成四個部分。分別對羥自由基、超氧陰離子自由基、DPPH自由基進行抗氧化活性實驗，通過測得的自由基清除率反映各極性部分的抗氧化能力。其中，乙酸乙酯相和正丁醇相與VC或BHT的自由基清除能力相當，證明乙酸乙酯相和正丁醇相具有較好的抗氧化能力。再將四個極性部分分別與SGC-7901(人胃癌細胞)、HT-29(人結直腸腺癌細胞)、HeLa(人宮頸

3、癌細胞)和PC-3(人前列腺癌細胞)四種腫瘤細胞進行毒性實驗，通過測得IC50值反映各極性部分的抗癌活性。其中，石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相對于SGC-7901的IC50值遠遠高于順鉑，但對于HT-29、HeLa和PC-3的IC50值比較接近順鉑，證明石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相對HT-29、HeLa和PC-3有較好的抑制作用。
　　二、對釀酒葡萄皮渣的石油醚相通過GC-MS檢測其揮發(fā)性成分，再對石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相

4、進行一系列的分離。主要采用硅膠柱色譜進行分離，得到10個化合物，將TLC和重結晶作為輔助手段，同時通過IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等波譜鑒定了其中6個化合物的結構。分別為：β-谷甾醇、棕櫚酸、對羥基苯甲酸、熊果酸、白藜蘆醇、蘆丁。
　　三、對釀酒葡萄皮渣中的白藜蘆醇分別用乙醇回流法、纖維素酶法、超聲波法進行提取工藝研究，采用紫外分光光度法檢測白藜蘆醇的提取效果。實驗中，針對影響不同提取方法的各個因素進行單因素實

5、驗，根據(jù)單因素實驗結果，制定正交實驗設計，了解乙醇濃度、料液比、提取溫度、提取時間對乙醇回流法的影響；了解酶的用量、酶解溫度、酶解時間、PH值對纖維素酶法的影響；了解乙醇濃度、料液比、超聲時間、超聲溫度對超聲波法的影響。得到了三種提取方法的最佳提取條件。在最佳提取條件下，乙醇回流法的最大提取率為0.0429%，纖維素酶法的最大提取率為0.0598%，超聲波法的最大提取率為0.3125%。
　　用超聲波輔助提取釀酒葡萄皮渣中的白藜蘆