胰島素磷脂復合物口服微乳的制備及體內(nèi)外評價.pdf

1、一、目的
　　 胰島素是一種多肽蛋白質(zhì)類藥物，其口服給藥一直是現(xiàn)代藥劑學的研究熱點和難點，而在眾多的制劑手段中，微乳被認為是應(yīng)用前景較好的一種給藥系統(tǒng)。由于胰島素是親水性藥物，一般載于微乳的水相，對于O/W微乳，藥物載于微乳外相，口服后會被胃腸道中的酶降解失活，對于W/O微乳，口服后被胃腸道中大量消化液稀釋而轉(zhuǎn)相，藥物仍會被降解失活。故本課題擬采用磷脂復合物技術(shù)，使胰島素與磷脂形成胰島素磷脂復合物(insulin-phospho

2、lipid complex, IPC)，增加胰島素的脂溶性，制備出胰島素載于油相的微乳，以減少口服后胰島素的降解失活，從而提高胰島素口服生物利用度，為胰島素這種多肽蛋白質(zhì)類藥物口服制劑的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　 二、方法與結(jié)果
　　 1.胰島素磷脂復合物的制備及表征
　　 以含5％冰醋酸的DMSO為溶劑，采用冷凍干燥法制備胰島素磷脂復合物。以透光率為指標，篩選磷脂/胰島素的比例和油相，以紅外光譜和X射線衍射分析驗證復

3、合物的形成，最后以皮下注射后的降血糖效果來考察復合物制備過程對胰島素生物活性的影響。結(jié)果顯示磷脂/胰島素質(zhì)量比為(32∶1)，油相為油酸乙酯時，胰島素溶解較完全，紅外光譜和X射線衍射分析驗證了胰島素磷脂復合物的形成，皮下注射后的降血糖效果顯示，復合物的制備過程對胰島素生物活性沒有顯著影響。
　　 2.胰島素磷脂復合物W/O、O/W微乳的制備及表征
　　 以油酸乙酯為微乳油相，通過偽三元相圖法篩選表面活性劑、助表面活性劑、

4、Km值等處方因素，確定了胰島素磷脂復合物W/O、O/W微乳的空白處方分別為:[Lecithin∶乙醇∶油酸乙酯∶水=26.67∶26.67∶35.55∶11.11（m/m/m/m）]、[EL35∶1，2-丙二醇∶油酸乙酯∶水=18.18∶6.06∶6.06∶69.70(m/m/m/m)]，所制得的IPC-W/O、IPC-O/W微乳的粒徑分別為27.3nm和18.6nm，多分散系數(shù)分別為0.117和0.141，載藥量分別為769.78±0

5、.86μg·mL-1和216.5±0.57μg·mL-1。胰島素磷脂復合物微乳室溫放置30天含量出現(xiàn)一定下降，4℃下基本穩(wěn)定。
　　 3.胰島素磷脂復合物微乳的體外評價
　　 通過體外酶降解實驗和Caco-2細胞模型上的轉(zhuǎn)運實驗對胰島素磷脂復合物口服微乳進行體外評價。體外酶降解實驗顯示，磷脂復合物微乳對胃蛋白酶、胰蛋白酶均具有顯著的抗酶降解作用，IPC-W/O微乳保護作用顯著強于IPC-O/W微乳，保護作用順序為:IPC

6、-W/O微乳＞ IPC-O/W微乳＞復合物。Caco-2細胞模型上的轉(zhuǎn)運實驗顯示，與胰島素溶液組相比，復合物、IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳組的表觀通透系數(shù)均有一定程度的增大，以胰島素溶液為對照組所得的轉(zhuǎn)運促進率R分別為1.26，1.48和1.50，IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳組大于復合物組，而IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳組之間則無顯著差別。
　　 4.胰島素磷脂復合物微乳的體內(nèi)評價
　　 通

7、過STZ糖尿病大鼠模型上的藥效學實驗對胰島素磷脂復合物口服微乳進行體內(nèi)評價。成模大鼠隨機分為5組，分別口服IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳、復合物(50IU·kg-1)，皮下注射胰島素溶液(1IU·kg-1)和不給藥為對照組，與對照組相比，IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳、復合物組血糖均出現(xiàn)不同程度下降，降糖效果為IPC-W/O微乳＞IPC-O/W微乳＞復合物，血糖最低值分別為初始值的66.7％、70.8％、82.02％，以

8、皮下注射胰島素組為參比，IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳、復合物組的口服藥理相對生物利用度分別為2.4％、1.8％、1.6％，相比皮下注射胰島素組，IPC-W/O微乳組降糖作用更持久。體內(nèi)藥效學研究顯示胰島素磷脂復合物微乳特別是IPC-W/O微乳口服后具有顯著降糖作用，表明此給藥系統(tǒng)能增加胰島素的口服吸收，用于胰島素口服給藥具有一定前景。
　　 三、結(jié)論
　　 本文以磷脂復合物技術(shù)，制備出胰島素載于油相的IPC-W