絲素材料裝載堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)后的促細胞生長作用.pdf

1、近年來家蠶絲素由于其獨特的理化性能已被作為組織修復用生物材料進行,在用作細胞培養(yǎng)載體、傷口輔料、人工皮膚及組織工程支架材料等方面已顯示出良好的效果和潛在開發(fā)應用前景。生長因子亦為近年來的關(guān)注熱點。堿性成纖維生長因子(bFGF)能夠促進了毛細血管增生,改善局部微循環(huán)及組織營養(yǎng)狀況,促進肉芽組織迅速生長,促使創(chuàng)面愈合。本文對裝載堿性成纖維生長因子(bFGF)的家蠶絲素膜和多孔材料的體外促進細胞生長作用以及其對SD大鼠背部真皮缺損創(chuàng)面的修復作

2、用進行了研究。主要內(nèi)容如下：
　　 ⑴制備裝載bFGF的家蠶絲素膜,通過體外細胞培養(yǎng),研究了L929細胞在裝載bFGF的家蠶絲素膜的生長情況,細胞形態(tài)觀察和MTT比色法的測定結(jié)果表明細胞種植天數(shù)相同的情況下,裝載bFGF的家蠶絲素膜上細胞的活力大于未裝載bFGF的家蠶絲素膜和膠原對照組。
　　 ⑵冷凍干燥法制備裝載bFGF的絲素多孔材料,用該材料作為培養(yǎng)L929細胞的載體,MTT測定細胞活力,結(jié)果表明該材料對細胞的生長和

3、增殖有促進作用。共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察結(jié)果顯示,L929細胞在裝載bFGF的絲素多孔材料上的增殖好于未裝載bFGF的絲素多孔材料。在細胞接種密度相同時,CLSM觀察L929細胞轉(zhuǎn)染攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的Ad-GFP-VEGF165腺病毒的結(jié)果可知,在裝載bFGF的絲素多孔材料中生長的L929細胞的轉(zhuǎn)染效率優(yōu)于未裝載bFGF的絲素多孔材料上的L929細胞的轉(zhuǎn)染效率。
　　 ⑶在SD大鼠真皮缺損部位植入裝載bFGF的絲素

4、多孔材料和未裝載bFGF的絲素多孔材料,在植入后第5,11,15,28天分別取材料植入部位及附近組織標本,進行HE染色和Masson染色,觀察其炎癥反應、成纖維細胞數(shù)量、新生毛細血管數(shù)量、材料與新生組織的融合情況和新生組織的形態(tài)。結(jié)果表明,無論是裝載bFGF的絲素多孔材料還是未裝載bFGF的絲素多孔材料其炎癥反應均輕微,能夠支持大鼠真皮組織的再生,15天時在多孔材料與組織的交界處就有較豐富的新生毛細血管,隨著時間的延長,新生毛細血管、成