高良姜黃酮類抑菌物質(zhì)提取分離及保鮮應(yīng)用的研究.pdf

1、高良姜(Alpinia officinarum Hance)是多年生草本植物，山姜屬。產(chǎn)于我國(guó)廣東、廣西、海南等省，在云南與臺(tái)灣有少量的種植及野生分布。高良姜含有大量的黃酮類、二苯基庚烷類等天然活性成分，研究表明植物黃酮具有鎮(zhèn)痛、抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗腹瀉等眾多生理活性。為了使高良姜資源得到充分利用，本文對(duì)高良姜黃酮類抑菌物質(zhì)進(jìn)行提取、分離、初步純化研究，采用HPLC、HPLC-MS對(duì)其抑菌成分做了初步的鑒定，將其應(yīng)用到水產(chǎn)品的保鮮方面

2、。研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
　　1、通過(guò)索氏抽提、超聲波輔助提取、微波輔助提取三種方法，以抑菌圈直徑&提取率為指標(biāo)。結(jié)果表明:微波輔助提取黃酮類物質(zhì)抑菌效果最好，超聲波輔助提取次之，索氏抽提效果最差。通過(guò)單因素、正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)合響應(yīng)面法優(yōu)化了提取工藝結(jié)果表明:微波輔助提取高良姜黃酮類抑菌物質(zhì)的最佳工藝為微波功率300W，料液比1∶20(m∶v)，提取時(shí)間25s，乙醇濃度75％，浸提時(shí)間4h，提取次數(shù)1次。在此條件下，高良姜中黃酮抑菌圈

3、直徑可以達(dá)到(17.8±0.38)mm。
　　2、通過(guò)紫外光照時(shí)間、溫度、pH、糖度、鹽度對(duì)高良姜黃酮類粗提物的影響研究。結(jié)果表明:紫外光照時(shí)間、溫度等5種因素對(duì)黃酮類粗提物的抑菌活性有一定的影響，在pH1～8范圍內(nèi)有較好的穩(wěn)定性，低糖度、低鹽度會(huì)促進(jìn)其抑菌活性，在酸性范圍內(nèi)10％的糖度、5％的鹽濃度其抑菌活性最強(qiáng)。通過(guò)抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:高良姜黃酮類粗提物對(duì)常見(jiàn)的細(xì)菌都有很好的抑菌活性，G+的抑菌活性大于G-。高良姜黃酮類粗提物對(duì)

4、蠟樣芽孢桿菌最敏感，MIC為0.0125mg/mL，MBC為0.025mg/mL。苯甲酸鈉對(duì)希瓦氏菌最為敏感，MIC為25mg/mL，MBC為25mg/mL，山梨酸鉀對(duì)蠟樣芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌最為敏感，MIC為2.5mg/mL，MBC為2.5mg/mL，高良姜中的揮發(fā)油對(duì)產(chǎn)黃青霉最為敏感，其最小抑菌濃度分別為0.03125mg/mL。
　　3、通過(guò)成分預(yù)測(cè)可知:高良姜中含有蛋白質(zhì)、糖、多糖和苷類，有機(jī)酸，萜類化合物，類固醇、香

5、豆素、內(nèi)酯及其苷類，生物堿，酚類，可能含有鞣質(zhì)。高良姜中成分復(fù)雜。未分級(jí)萃取層含有抑菌活性，但活性小于萃取以后的乙酸乙酯層，能力與氯仿層相近。抑菌活性最強(qiáng)的是乙酸乙酯層，氯仿層次之，正丁醇較弱，幾乎沒(méi)有抑菌活性的是水層。通過(guò)聚酰胺柱層析、硅膠柱層析、葡聚糖凝膠柱層析對(duì)粗體物進(jìn)行分離純化，得出了15、24、25、26、a、b這六個(gè)組分抑菌活性較高。通過(guò)顏色特征反應(yīng)、紫外掃描光譜可初步判定提取的抑菌物質(zhì)屬于黃酮類物質(zhì)。通過(guò)HPLC及UPLC

6、-MS/MS對(duì)分離出的六個(gè)組分進(jìn)行了定性與定量分析，發(fā)現(xiàn)提取物中含有高良姜素、槲皮素、原兒茶酸、喬松素、姜黃素、山萘酚等物質(zhì)，其中高良姜素是高良姜的的特征物質(zhì)，含量明顯高于其他物質(zhì)。綜合以上分析結(jié)果可知:高良姜中起抑菌作用最主要的物質(zhì)為高良姜素、槲皮素、山萘酚、喬松素，其次為姜黃素、原兒茶酸。
　　4、通過(guò)高良姜黃酮類粗提物、純化物和山梨酸鉀分別處理蝦肉糜、魚(yú)肉糜，結(jié)果表明:在貯藏過(guò)程中的感官評(píng)分、pH、TVB-N和細(xì)菌總數(shù)的變化