蓮子多糖抗衰老功能及其分子機(jī)制的研究.pdf

1、蓮子（Nelumbo nucifera），是一種多年水生草本植物，屬睡蓮科蓮屬，是我國(guó)水生特種作物之一，含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，具有特殊的藥用保健功效。本課題采用福建主產(chǎn)建寧蓮子為原料，提取蓮子多糖，對(duì)其進(jìn)行分離純化，研究了蓮子多糖的體內(nèi)外抗氧化作用、延緩果蠅衰老功能及其分子機(jī)制，為蓮子多糖應(yīng)用于保健食品提供理論依據(jù)。
　?。?）對(duì)水提、酸提和堿提蓮子多糖的提取工藝進(jìn)行了研究，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上通過(guò)正交試驗(yàn)得出三種提取方法的最佳提取工

2、藝：其中水提法的料液比1：10，浸提溫度為100℃，浸提時(shí)間為3h，蓮子可溶性多糖的提取率為9.57%；酸提蓮子多糖的最佳工藝條件為鹽酸濃度0.15mol/L，提取溫度80℃，提取時(shí)間40min，料液比1:25，提取率為13.12%；堿提蓮子多糖的最佳工藝參數(shù)為堿濃度0.2mol/L，提取溫度90℃，時(shí)間10min，多糖得率為11.70%，與水提法相比，酸提和堿提均能提高蓮子多糖的提取率。
　?。?）研究了蓮子多糖的分離純化工藝，

3、并以 Vc為對(duì)照，研究了水提蓮子粗多糖（LSP1）和純化后多糖(LSP2)的總抗氧化能力、總超氧化物歧化酶活性和 DPPH?清除率。研究表明，水提、酸提和堿提蓮子多糖經(jīng)過(guò) Sephadex G-100柱純化后均只得到一個(gè)相同組分，水提蓮子多糖LSP1和LSP2的總抗氧化能力、總超氧化物歧化酶活性和 DPPH?清除率均隨多糖濃度的升高而增大，蓮子多糖LSP1的總抗氧化能力和總超氧化物歧化酶活性均高于LSP2，而DPPH?清除率低于 LSP

4、2。濃度為2mg/mL時(shí)，蓮子多糖 LSP1、LSP2的總抗氧化能力分別為51.08U/mL、39.25U/mL；總超氧化物歧化酶活性分別為30.48 U/mL、18.64 U/mL；DPPH?清除率分別為21.5%、62.99%。
　?。?）通過(guò)果蠅生存實(shí)驗(yàn)，研究了分別加入0%、0.25%、0.5%、1%蓮子多糖的培養(yǎng)基對(duì)果蠅平均壽命、半數(shù)死亡期、平均壽命延長(zhǎng)率和最高平均壽命的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，在培養(yǎng)基中添加0.25%蓮子多糖

5、能顯著提高雌性果蠅的最高平均壽命，延長(zhǎng)率為6.72%；添加0.5%的蓮子多糖對(duì)雌性果蠅的平均壽命、半數(shù)死亡時(shí)間和最高平均壽命的延長(zhǎng)率分別為18.87%、17.78%、10.93%，其中對(duì)平均壽命和半數(shù)死亡時(shí)間的延長(zhǎng)效果達(dá)到顯著水平，對(duì)最高平均壽命的延長(zhǎng)效果達(dá)到極顯著水平；添加0.5%蓮子多糖對(duì)雄性果蠅的平均壽命、半數(shù)死亡時(shí)間和最高平均壽命的延長(zhǎng)率分別為13.65%、19.56%、11.44%，其中對(duì)平均壽命和最高平均壽命的延長(zhǎng)效果達(dá)到顯

6、著水平，對(duì)半數(shù)死亡時(shí)間的延長(zhǎng)效果達(dá)到極顯著水平，在培養(yǎng)基中添加0.5%蓮子多糖對(duì)果蠅壽命的延長(zhǎng)效果最好。
　?。?）研究了不同濃度蓮子多糖對(duì)果蠅組織勻漿總抗氧化能力、超氧自由基、羥自由基、丙二醛、過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶能力的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，培養(yǎng)基中添加0.25%蓮子多糖能顯著提高雄性果蠅的抗超氧陰離子能力，極顯著提高雌性果蠅清除羥自由基能力，提高率分別為18.20%、5.13%；添加0.5%蓮子多糖能夠顯著提高雄性果蠅和雌

7、性果蠅的總抗氧化能力，提高率分別為27.66%、11.54%，顯著提高雄性果的CAT含量，提高率為22.17%，顯著提高雄性果蠅的SOD活性，極顯著提高雌性果蠅的SOD活性，提高率分別為19.91%和22.37%，極顯著提高雄性果蠅的抗超氧陰離子能力，提高率為21.92%，極顯著提高雌性果蠅清除羥自由基能力，提高率為8.88%；添加1%蓮子多糖能顯著提高雄性果蠅的抗超氧陰離子能力，提高率為12.14%。蓮子多糖能增強(qiáng)黑腹果蠅抗氧化能力，

8、可清除體內(nèi)自由基，并減少脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA的生成，因此具有一定的抗衰老功能。
　?。?）通過(guò)果蠅氧化應(yīng)激實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)蓮子多糖各劑量均能提高雙氧水處理下的果蠅生存時(shí)間，中劑量組（蓮子多糖添加量為0.5%）果蠅各指標(biāo)存活時(shí)間延長(zhǎng)效果最好。RT-PCR分析表明，與對(duì)照組相比，蓮子多糖各劑量組CuZnSOD基因、MnSOD基因和CAT基因表達(dá)量均上調(diào)，中劑量組（蓮子多糖添加量為0.5%）果蠅各基因表達(dá)量上調(diào)最高。因此可以得出結(jié)論，蓮子多糖可