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文檔簡介
1、谷胱甘肽(glutathione)是自然界廣泛存在的生物活性三肽，是L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸的縮合物。GSH有多種重要生理功能，因此它在臨床治療、食品、保健和體育等領域的應用非常廣泛。雖然國內也開始了有關研究和工業(yè)化生產，但是由于國產GSH的產量和純度遠遠不如國外產品，于是國外GSH產品壟斷我國市場的局面始終沒有改變。在這種背景下，本文對提高本實驗室保藏的畢赤酵母菌(Pichia pastoris)Y的GSH產量進行了研究。 2、r> 初始菌株畢赤酵母Y的GSH產量為81.43mg/L。以Y為出發(fā)菌株，對其進行紫外線、亞硝酸、亞硝基胍單因素誘變、雙因素誘變和三重因素誘變。實驗結果表明三重誘變的效果最好。Y首先經過連續(xù)的紫外誘變后，得到的突變菌株Y1的GSH產量比Y提高了51.6％。Y1再采用亞硝酸多次連續(xù)誘變后，得到突變菌株Y2，GSH產量達到147.53mg/L，比Yl提高了4.7%。最后使用亞硝基胍對Y2進行誘變，得到了GSH產量比Y2提高了3.1%的突變 3、菌株Y3。
對突變菌株Y3，進行發(fā)酵培養(yǎng)基及環(huán)境條件的優(yōu)化。發(fā)酵培養(yǎng)基組分的優(yōu)化組合為葡萄糖20g/L，酵母粉3g/L，(NH4)2S044g/L，KH2PO44.0g/L，MgSO41.5g/L。其次考察了發(fā)酵環(huán)境因素酵母菌GSH產量的影響，確定了搖瓶水平下發(fā)酵的最優(yōu)條件為接種量9%，發(fā)酵溫度采用28℃，初始pH值為5.5，裝液量為40mL/250mL。經過發(fā)酵條件優(yōu)化后，最終GSH的產量提升到169.88mg/L，與初始菌
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