纖維素表面多層定向固定化蛋白質.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、固定化酶技術最早主要出現在單酶固定化方面的研究，近幾年來越來越多的研究者開始研究多酶共固定化技術，然而無論是單酶還是多酶固定化都存在著固定化酶數量較少、固定化酶分子活性中心被隱藏等問題。因此本課題研究的目的是尋找一種新型高效固定化技術來解決上述存在的問題，同時給工業(yè)酶制劑多酶復合固定化提供理論基礎和技術支撐。
　　實驗選擇纖維素作為固定化載體，以綠色熒光蛋白GFP作為固定化目標蛋白質，借助基因重組技術手段構建一套完整的多層定向自主

2、裝固定化體系，并且在該體系中引入支架蛋白作為載體與目標蛋白的連接橋梁。該課題有兩大創(chuàng)新點，第一點是載體表面的每個支架蛋白不僅可以固定至少兩倍的目標蛋白，還可以調控該支架蛋白的長度來間接控制目標蛋白的數量;第二點是支架蛋白與固定化目標蛋白能夠特異性定向的親和結合，從而避免固定化目標蛋白活性位點被破壞的可能性。該實驗首先利用支架蛋白末端的纖維素結合域與載體表面進行親和吸附，然后通過支架蛋白上的每個位點基于錨定域與粘合域的親和作用方式再次固定

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