青菜衰老和短期逆境處理的早期檢測(cè)指標(biāo)研究.pdf

1、本論文以青菜(Brassica rapa var chinensis)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，選用不同方法檢測(cè)葉片衰老過程中各指標(biāo)變化，從而找出能表現(xiàn)葉片衰老的先期指標(biāo)，并對(duì)篩選出的指標(biāo)進(jìn)行葉片逆境忍受程度的實(shí)驗(yàn)。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　(1)通過使用不同的光譜方法檢測(cè)青菜葉片衰老過程的各項(xiàng)指標(biāo)。使用葉綠素?zé)晒鉁y(cè)定儀檢測(cè)青菜衰老過程中的熒光參數(shù)，發(fā)現(xiàn)0-1d青菜的非光學(xué)猝滅系數(shù)qN和NPQ有顯著變化，可作為無損檢測(cè)青菜衰老的早期指標(biāo)。其次是紫

2、外分光光度計(jì)積分球無損檢測(cè)青菜，可以發(fā)現(xiàn)次早期的1-2d青菜的顯著差異。近紅外光譜無損檢測(cè)青菜葉綠素含量的方法是可行的，可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)測(cè)定方法大批量無損快速檢測(cè)青菜葉綠素。
　　(2)青菜熱乙醇的提取液使用熒光分光光度計(jì)測(cè)定。在激發(fā)波長(zhǎng)434nm，發(fā)射波長(zhǎng)673 nm檢測(cè)熒光強(qiáng)度，是0-1d的青菜早期衰老檢測(cè)最佳指標(biāo);其次激發(fā)波長(zhǎng)255 nm，發(fā)射波長(zhǎng)347nm檢測(cè)熒光強(qiáng)度，也可以檢測(cè)0-1d的青菜顯著變化。激發(fā)波長(zhǎng)255nm，發(fā)射

3、波長(zhǎng)512nm檢測(cè)熒光強(qiáng)度，可以作為1-2 d的青菜次早期衰老檢測(cè)指標(biāo)。
　　(3)分別選用鉀、鈣、鈉、氯離子和氨電極檢測(cè)青菜葉片衰老過程中每天的離子滲漏情況，發(fā)現(xiàn)氯、鉀離子溶出總量大，并且主要是細(xì)胞膜內(nèi)溶出;鈉、鈣、銨離子次之。鈉、鈣離子和氨早期有大量溶出，說明其在細(xì)胞間隙大量存在。鈣離子在細(xì)胞外以結(jié)合態(tài)存在，鈣離子胞外溶出變化大，說明細(xì)胞壁成分有早期變化。葉片衰老時(shí)，各種離子溶出顯著增加。鈣離子電極在0-1d的青菜上升的靈敏度

4、最高，最適合早期測(cè)定青菜衰老。銨離子在1-2 d，以及其后溶出最顯著。青菜衰老中細(xì)胞內(nèi)溶出的金屬離子以鉀電極測(cè)定最為顯著。
　　(4)通過靜態(tài)頂空-氣質(zhì)聯(lián)用、未酯化和酯化的氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定青菜葉片揮發(fā)性物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)靜態(tài)頂空-氣質(zhì)聯(lián)用和未酯化的氣質(zhì)聯(lián)用法檢測(cè)出的青菜葉片揮發(fā)性成分不足10種，而樣品酯化后測(cè)出了多達(dá)50種揮發(fā)性成分，說明樣品需要酯化后才能準(zhǔn)確測(cè)出質(zhì)膜成分。0-1d青菜的亞麻酸、亞油酸、棕櫚酸、7，10，13-十六碳三烯酸、油

5、酸-β--烯-豆甾醇酯和葉綠醇，出現(xiàn)了顯著性的變化，可以作為青菜衰老早期指標(biāo)。1-2 d青菜的乙酸-β-谷甾醇、棕櫚油酸也出現(xiàn)顯著變化，可以作為次早期檢測(cè)指標(biāo)。但氣質(zhì)檢測(cè)的缺點(diǎn)是樣品需要破壞、提取、酯化，還需要高檔儀器。
　　(5)通過高效液相色譜法測(cè)定青菜衰老過程中游離氨基酸的變化，發(fā)現(xiàn)賴氨酸0-1d大量上升，上升了1.76倍，1-2d出現(xiàn)高峰，后下降。門冬氨酸和脯氨酸反而隨著青菜衰老出現(xiàn)下降，其放置1d就有很大的下降。但青菜脯

6、氨酸含量很少，容易漏檢。因此，門冬氨酸和賴氨酸可能適合作為青菜衰老的早期指標(biāo)。
　　(6)通過以上三種方法選出葉綠素?zé)晒鉁y(cè)定儀和鉀離子溶出作為最容易檢測(cè)的指標(biāo)，對(duì)青菜短期逆境忍受能力進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)青菜失水20％以下基本正常，很耐失水，且高溫和低溫極限分別為46℃和1℃。10％乙醇處理，青菜葉片正常，20％乙醇已經(jīng)有不良影響。0.1％乙酸處理，青菜的qN和NPQ顯著上升，啟動(dòng)光合作用抗逆境機(jī)制。0.6％以上乙酸處理青菜的葉綠素?zé)晒鈪?/p>