利水滲濕法對(duì)髓核自身免疫模型大鼠血清IgG、IgM及IL-1β、IL-8的影響.pdf

1、研究背景
　　 腰椎間盤(pán)突出癥(LumbarDiscHerniation,LDH)是導(dǎo)致腰腿疼痛的常見(jiàn)疾病。傳統(tǒng)的機(jī)械性壓迫學(xué)說(shuō)并不能圓滿的解釋腰椎間盤(pán)突出癥的發(fā)病機(jī)制。隨著研究工作的進(jìn)展,越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)識(shí)到本病的發(fā)病機(jī)制是十分復(fù)雜的,突出的椎間盤(pán)組織所誘發(fā)的自身免疫反應(yīng)及其介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在LDH的發(fā)病過(guò)程中可能具有重要作用。某些西藥對(duì)該病有較好療效,但反復(fù)使用這類(lèi)藥物,易對(duì)人體產(chǎn)生較多的副作用。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,一些中藥具

2、有提高機(jī)體免疫力、雙向調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的作用,并可避免應(yīng)用西藥產(chǎn)生的副作用。進(jìn)一步明確中藥治療LDH在免疫學(xué)方面的藥理機(jī)制,可為臨床工作提供更為科學(xué)客觀的思路及依據(jù)。
　　 研究目的
　　 探討利水滲濕法對(duì)大鼠髓核引起的自身免疫及免疫炎癥反應(yīng)的影響,為腰椎間盤(pán)突出癥的中藥免疫治療提供依據(jù)。
　　 研究方法
　　 將40只雄性Wistar大鼠按體重分層隨機(jī)分組的方法分為假手術(shù)組(A組)、模型對(duì)照組(B組)、秋水

3、仙堿片組(C組)、輕腰湯加味組(D組),每組10只。B組、C組與D組進(jìn)行造模:通過(guò)手術(shù)將大鼠尾椎髓核移植于臀部肌中,造成自身免疫及免疫炎癥反應(yīng)；A組只做假手術(shù)處理。各組大鼠于術(shù)后第3天開(kāi)始灌胃,A組和B組用蒸餾水(10ml／kg),C組和D組分別用秋水仙堿片混懸液(10ml／kg,0.01mg／ml)和輕腰湯加味水煎液(10ml／kg,1.035g／ml),每天1次,連續(xù)18d。于術(shù)后21d處死動(dòng)物,應(yīng)用ELISA法檢測(cè)血清中免疫球蛋白

4、G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)及白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)的含量,并觀察移植髓核周?chē)M織的病理變化。
　　 研究結(jié)果
　　 1一般情況
　　 造模過(guò)程中,A組中一只大鼠腹腔注射麻醉后10min死亡,分析因?yàn)榭赡苁莻€(gè)體差異導(dǎo)致的。其余大鼠均于術(shù)后1～2h清醒。大鼠臀部和尾部的切口均在6～10天愈合,食量正常,無(wú)明顯感染征象及死亡。
　　 2IgG、IgM及IL-1β、IL-8的

5、測(cè)定
　　 4組比較,血清IgG、IgM及IL-1β、IL-8含量組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。B組與A組比較血清IgG、IgM及IL-1β、IL-8含量均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；C組、D組與B組比較血清IgG、IgM及IL—1β、IL-8含量均明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；D組與C組比較血清IgG、IgM及IL-1β含量均無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而D組

6、血清IL-8含量較C組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。說(shuō)明輕腰湯加昧與秋水仙堿片對(duì)模型大鼠血清IgG、IgM及IL-1β、IL-8含量的升高均有明顯抑制作用,且輕腰湯加味對(duì)模型大鼠血清IL-8含量升高的抑制作用優(yōu)于秋水仙堿片(見(jiàn)總表)。
　　 注:A組=假手術(shù)組,B組=模型對(duì)照組,C組=秋水仙堿片組,D組=輕腰湯加味組。4組間比較,①F=6.626,P<0.01；②F=7.111,P<0.01；③F=10.866,P

7、<0.01；④F=13.343,P<0.01。與A組比較,*P<0.01；與B組比較,ΔP<0.05,▲P<0.01；與C組比較,□P>0.05,■P<0.05。
　　 3組織形態(tài)學(xué)觀察
　　 3.1假手術(shù)組:可見(jiàn)肌纖維結(jié)構(gòu)正常,未見(jiàn)肌間隙炎細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維結(jié)締組織增生(圖1-1～1-3)。
　　 3.2模型對(duì)照組:可見(jiàn)肌纖維斷裂,肌細(xì)胞胞漿嗜堿性,較多以淋巴細(xì)胞為主的炎細(xì)胞浸潤(rùn),纖維結(jié)締組織增生明顯(圖2-1～2

8、-3)。
　　 3.3秋水仙堿片組:可見(jiàn)肌纖維斷裂小明顯,肌細(xì)胞胞漿輕度嗜堿性變,少量炎細(xì)胞浸潤(rùn),纖維結(jié)締組織輕度增生(圖3-1～3-3)。
　　 3.4輕腰湯加味組:未見(jiàn)明顯肌纖維斷裂及肌細(xì)胞嗜堿性變,僅在充血的血管周?chē)猩倭垦准?xì)胞浸潤(rùn),未見(jiàn)明確纖維結(jié)締組織增生(圖4-1～4—3)。
　　 結(jié)論
　　 1髓核能引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清中IgG、IgM免疫球蛋白及IL-1β、IL-8免疫炎性因子含量的異常升高,并

9、對(duì)周?chē)M織形成免疫炎性損傷,據(jù)此推測(cè),髓核作為自身抗原可激發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答并介導(dǎo)自身免疫炎癥反應(yīng),其可能與接觸血運(yùn)有關(guān)。
　　 2利水滲濕法可抑制動(dòng)物血清中異常升高的IgG、IgM及IL-1β、IL-8,并可改善髓核對(duì)周?chē)M織的免疫炎性損傷,據(jù)此推測(cè),利水滲濕法對(duì)髓核引起的自身免疫及免疫炎癥反應(yīng)有抑制作用,這可能是此法治療LDH的機(jī)制之一。
　　 3利水滲濕法可抑制自體髓核引起的自身免疫及免疫炎癥反應(yīng),為L(zhǎng)DH的中藥免疫治