水蛭素對人增生性瘢痕成纖維細胞作用的實驗研究.pdf

1、增生性瘢痕(hypertrophic-scar，HS)是創(chuàng)傷后，尤其是深度燒傷后最常見的一種病理性愈合現象。其本質是成纖維細胞(fibroblast，FB)的異常增殖和細胞外基質的過度沉積。在當今，盡管對增生性癱痕的發(fā)病機制和治療手段進行了大量的研究，但目前仍沒有理想的結果。因此尋求有效防治增生性瘢痕的方法是創(chuàng)傷修復領域的重要課題。經研究表明，水蛭素具有抑制器官纖維化、抗炎等作用。本實驗對體外培養(yǎng)的增生性瘢痕成纖維細胞(hypertro

2、phic scar fibroblast，HSFb)進行了以下實驗內容，深入研究了水蛭素對HSFb的抑制作用，探討水蛭素對HS的作用方式和機制，為臨床治療HS提供理論依據。
　　 目的：研究水蛭素誘導體外培養(yǎng)的人增生性瘢痕成纖維細胞凋亡的作用及相關機制。
　　 方法：分離培養(yǎng)HSFb，取4-7代細胞，實驗組水蛭素濃度為1u/mL、0.5u/mL、0.25u/mL、0.125u/mL，對照組選擇完全培養(yǎng)基處理，觀察藥物對細

3、胞的影響。檢測指標：1.倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化；2.MTT法檢測細胞活力及細胞計數；3.免疫細胞化學染色檢測HSFb中bax和bcl-2的表達；4Westernblot法檢測bax和bcl-2的蛋白表達。
　　 結果：
　　 1.MTT比色結果顯示水蛭素作用于HSFb的增殖呈現出明顯的抑制趨勢，且和藥物濃度呈相關性。
　　 2.水蛭素處理后細胞凋亡率增加，和對照組相比有統(tǒng)計學差異。
　　 3.免疫

4、組化實驗圖形分析軟件分析結果表明，和對照組相比，水蛭素干預組bax表達增加，bcl-2表達下降。
　　 4.Westernblot法檢測和對照組相比，水蛭素干預組bax表達增加，bcl-2表達下降。
　　 結論：本實驗通過對體外培養(yǎng)人增生性瘢痕成纖維細胞不同指標的檢測，證實水蛭素對人增生性瘢痕成纖維細胞有顯著的抑制作用，其抑制作用可能與以下幾個方面有關：
　　 1.水蛭素可改變細胞形態(tài)；
　　 2.水蛭素