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文檔簡介
1、目的:研究大黃素對P2X2/3受體介導的神經病理痛的鎮(zhèn)痛作用,并探討其可能機制。
方法:制備大鼠坐骨神經慢性壓迫性損傷(Chronic constriction injury,CCI)神經病理痛模型,雄性大鼠隨機分為空白對照組(Control)、假手術對照組(Sham)、CCI大鼠模型組(CCI)、大黃素處理對照組(Emodin)、CCI模型+大黃素處理組(CCI+emodin)5組。動物行為學方法分別觀察5組大鼠的機械縮
2、足反射閾值(MWT)和熱縮足反射潛伏期(TWL),觀察大黃素對CCI大鼠痛行為的影響;原位雜交法和RT-PCR觀察各組L4-L5背根神經節(jié)中的P2X2/3受體mRNA的表達情況3、免疫組織化學染色法和Western Blotting觀察各組L4-L5背根神經節(jié)中的P2X2/3受體蛋白的表達情況。
結果:⑴手術后5-7 d,坐骨神經神經病理痛大鼠模型基本形成,CCI大鼠模型組和CCI+emodin組大鼠右后肢的MWT和TWL
3、明顯降低,與Control組、Sham組和Emodin組比較有統(tǒng)計學意義(p<0.05),而Sham組、Emodin組和Control之間相比較無顯著性差異(p>0.05);手術后7-14 d,CCI+emodin組大鼠的MWT和TWL明顯升高,與CCI組大鼠相比有統(tǒng)計學差異(p<0.05),與Control組之間相比較無顯著性差異(p>0.05);⑵術后14 d,原位雜交、RT-PCR顯示,P2X2/3受體mRNA的表達在CCI組大鼠
4、L4-L5背根神經節(jié)明顯升高(p<0.01),而在CCI+emodin組大鼠背根神經節(jié)的表達較CCI組低(p<0.01);⑶免疫組化和蛋白印跡結果顯示,與Control組、Sham組和Emodin組相比,CCI組大鼠L4-L5背根神經節(jié)P2X2/3受體蛋白的表達明顯升高(p<0.01),而CCI+emodin組背根神經節(jié)P2X2/3受體蛋白的表達較CCI組低(p<0.01)。
結論:大黃素對初級感覺神經元P2X2/3受體介
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