丁酸梭菌對實驗性大腸桿菌K88感染肉雞免疫功能、腸道屏障功能和盲腸微生物的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本試驗研究了丁酸梭菌對多種致病菌的體外抑菌效果和對肉雞免疫、腸道屏障功能以及腸道菌群的影響。試驗包括兩部分:試驗一,研究了丁酸梭菌與鼠李糖乳桿菌對腸道致病菌的體外抑菌效果;試驗二,是通過對肉雞進行大腸桿菌K88感染后,研究日糧中添加丁酸梭菌對感染肉雞的免疫功能、腸道粘膜形態(tài)、腸道屏障功能以及盲腸微生物的影響。
   試驗一:將丁酸梭菌、鼠李糖乳桿菌單株及兩株菌按照1∶1混合后分別與大腸桿菌C82928、金黃色葡萄球菌SHZ018

2、、沙門氏菌C79及產(chǎn)氣莢膜梭菌以100∶1的比例混合接種于厭氧液體培養(yǎng)基中進行厭氧培養(yǎng)。結(jié)果表明丁酸梭菌單株及與鼠李糖混合培養(yǎng)組對大腸桿菌C83928從8h開始有明顯抑制作用,但鼠李糖乳桿菌單株對大腸桿菌C83928沒有抑制作用;丁酸梭菌單株對產(chǎn)氣莢膜梭菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌都從12h開始有明顯的抑制作用,使菌量下降3-4個數(shù)量級,鼠李糖乳桿菌對這3株菌有一定的抑制作用,可使菌量下降1-2個數(shù)量級,兩種益生菌混合后對產(chǎn)氣莢膜梭菌和

3、沙門氏菌的抑制效果比丁酸梭菌單株顯示出稍強的生物拮抗作用,因此認為這種抑菌作用主要是由于丁酸梭菌引起。
   試驗二:選取1日齡雛雞360羽,隨機分為4組,分別為丁酸梭菌組、抗生素組、空白對照組和攻毒組,每組6個重復,每個重復15只雞,空白對照組、攻毒組飼喂無抗生素的基礎日糧,丁酸梭菌組飼喂含2×107CFU/g丁酸梭菌的日糧、抗生素組飼喂含20mg/kg硫酸粘桿菌素的日糧,7日齡時攻毒組、丁酸梭菌組和抗生素組分別口服1×108

4、CFU/g大腸桿菌K88菌液0.5ml,空白對照組口服生理鹽水0.5ml。分別于10、14、21、28日齡時,每組選取6只屠宰,搜集血清、空腸腸段、腸道粘膜內(nèi)容物、盲腸內(nèi)容物。
   試驗結(jié)果表明:日糧添加丁酸梭菌有助于提高血清補體C3、C4、溶菌酶的含量,在感染動物免疫反應中發(fā)揮重要的作用。10日齡時,丁酸梭菌組補體C3含量分別比抗生素組、空白對照組高23.07%(P<0.05)、38.59%(P<0.05);-體C4含量比抗

5、生素組、空白對照組、攻毒組分別高22.34%(P<0.05)、35.24%(P<0.05)、32.44%(P<0.05)。14日齡時,丁酸梭菌組補體C4含量比攻毒組高14.58%(P<0.05);21日齡時,丁酸梭菌組的C3、C4及溶菌酶的含量均顯著高于其它試驗組。
   日糧中添加丁酸梭菌能夠增強肉雞血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM及腸粘膜sIgA的含量,對機體防御大腸桿菌感染有積極意義。丁酸梭菌組、抗生素組各個時間點Ig

6、A、IgM、IgG均高于攻毒組。10日齡時,丁酸梭菌組、抗生素組、攻毒組IgA分別比空白對照組高47.7%(P<0.05)、34.03%(P<0.05)、35.66%(P<0.05);丁酸梭菌組血清中IgG的含量比空白對照組組高22.24%(P<0.05);丁酸梭菌組空腸黏膜中sIgA含量分別比抗生素組、空白對照組和攻毒組高45.50%(P<0.05)、88.94%(P<0.05)和95.32%(P<0.05)。14日齡時,丁酸梭菌組s

7、IgA含量比攻毒組高45.71%(P<0.05)。21d日齡,丁酸梭菌組、抗生素組IgA分別比攻毒組高25.22%(P<0.05)、16.54%(P<0.05)。28日齡時,丁酸梭菌組IgM分別比抗生素組、空白對照組、攻毒組高22.83%(P<0.05)、49.53%(P<0.05)、22.89%(P<0.05)。
   日糧中添加丁酸梭菌有利于提高大腸桿菌K88感染肉雞腸道粘膜細胞因子水平,從而提高機體免疫力。整個試驗階段表現(xiàn)

8、出丁酸梭菌組與抗生素組TNF-a、IL-4含量均略高于攻毒組。10日齡時,10d時,丁酸梭菌組的空腸黏膜中TNF-a、IL-4的含量均高于抗生素組、空白對照組、攻毒組,丁酸梭菌組空腸黏膜中TNF-a含量比攻毒組提高56.84%(P<0.05)。21日齡時,丁酸梭菌組、抗生素組、空白對照組白介素IL-4的含量分別比攻毒組高38.31%(P<0.05)、18.47%(P>0.05)、35.22%(P<0.05)。
   日糧中添加丁

9、酸梭菌能促進感染大腸桿菌肉雞空腸絨毛的生長。10日齡時,丁酸梭菌組隱窩深度顯著低于其它組;14、21、28日齡時丁酸梭菌組、抗生素組、空白對照組隱窩深度均顯著低于攻毒組;丁酸梭菌組空腸絨毛高度在14d、21d、28日齡時均顯著高于其它試驗組。
   日糧中添加丁酸梭菌能促進腸道屏障功能的修復,降低血清內(nèi)毒素、二胺氧化酶(DAO)的含量及細菌移位的發(fā)生率。大腸桿菌感染各組血清內(nèi)毒素水平及DAO含量在各個時間點均顯著高于空白對照組,

10、21日齡時,攻毒組DAO含量分別比丁酸梭菌組、抗生素組高49.11%(P<0.05)、48.87%(P<0.05)。28日齡時,攻毒組內(nèi)毒素含量分別比丁酸梭菌組、空白對照組高25%(P<0.05)、50.79%(P<0.05);各組的細菌易位率隨著時間是逐漸降低的,并且各個時間點,丁酸梭菌組和抗生素組的細菌易位率均低于攻毒組,尤以丁酸梭菌組效果最為明顯。
   日糧中添加丁酸梭菌能于促進肉雞盲腸有益菌的生長,抑制致病菌的生長。1

11、4、21日齡時,丁酸梭菌組肉雞盲腸內(nèi)容物乳酸菌數(shù)量顯著高于其它組,雙歧桿菌的數(shù)量比攻毒組高8.50%(P<0.05);盲腸內(nèi)容物丁酸梭菌含量分別比攻毒組高7.20%(P<0.05)。28日齡時,丁酸梭菌組盲腸內(nèi)容物的乳酸菌數(shù)量比抗生素組高6.46%(P<0.05),雙歧桿菌數(shù)量顯著高于其它組。日糧中添加丁酸梭菌有利于減少致病情況下肉雞盲腸大腸桿菌的數(shù)量,10日齡時,攻毒組盲腸內(nèi)容物中大腸桿菌的數(shù)量顯著高于丁酸梭菌組和抗生素組,21、28

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